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J-GLOBAL ID:201702214682741529   整理番号:17A0409107

付着末端鎖置換に基づくヒトテロメラーゼRNAの超高感度およびロバスト検出のためのサイトメトリー分析【Powered by NICT】

A cytometric assay for ultrasensitive and robust detection of human telomerase RNA based on toehold strand displacement
著者 (6件):
資料名:
巻: 87  ページ: 1071-1076  発行年: 2017年 
JST資料番号: D0173C  ISSN: 0956-5663  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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線形真核生物染色体の末端テロメアDNA反復配列の合成のためのテンプレートとして働き,ヒトテロメラーゼRNA(hTR)は,腫瘍細胞で過剰発現しており,その濃度はテロメラーゼ活性と正の相関を示した。複雑なマトリックスにおけるhTRの検出のための容易で信頼できる方法の欠如は,臨床診断のためのその応用を制限している。限界を,ここにするために,著者らはDNA付着末端DNA鎖交換反応(TSDR)の信号増幅を持つ磁気濃縮を組合せてhTRの高感度及び特異的検出のための容易で信頼性のあるフローサイトメトリー分析法を提案した。TSDRの二ヘアピンDNAプローブを巧みに設計され,ビオチン化ヘアピンDNA1(H1)及びカルボキシフルオレセイン(FAM)-標識ヘアピンDNA2(F-H2)を含む。,H1はビオチン-アビジン相互作用を介してストレプトアビジン官能化磁気ビーズ(STV MBs)上に固定化した。hTR DNAが存在すると,H1とF-H2間のTSDRは連続的にH1/H2二本鎖を形成する引き金になった,MBの表面上の「ターンオン」蛍光をもたらした。TSDRと磁気濃縮の蛍光増幅のために,hTR DNAは,フローサイトメトリー及び蛍光顕微鏡イメージングにより解析した特異的かつ容易であることができる。フローサイトメトリーの検出限界は0.3pMであり,これはほとんどの既存のアプローチのものより優れていた。また,提案手法を用いて,複雑な生物学的媒体においてもhTRを検出することに成功した。,ロバストで迅速な検出hTR DNA,疾患関連遺伝子を研究するための容易で信頼性のある高感度法を提供するに提供される無酵素増幅アプローチ。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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バイオアッセイ  ,  分析機器 

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