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J-GLOBAL ID:201702214879845652   整理番号:17A0173088

FGF20原核発現ベクターの構築及び大腸菌における最適化発現【JST・京大機械翻訳】

Construction of FGF20 prokaryotic expression vector and optimized expression in E. coli
著者 (4件):
資料名:
巻: 26  号:ページ: 438-443,420  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2985A  ISSN: 1004-311X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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[目的]ヒトFGF20原核発現ベクターを構築し、大腸菌(ESCHERICHIA COLI,E. COLI)において発現を最適化する。【方法】RT-PCR法により,ヒト胃癌細胞からFGF20遺伝子を増幅し,PET28B-FGF20ベクターを構築し,Eに変換した。大腸菌はIPTGにより誘導された。OD値,IPTG濃度,誘導温度,時間及び溶存酸素濃度を最適化し,直交試験により培地の最適化を行い,SDS-PAGE及びウエスタンブロットにより蛋白質発現を検出し,最適発現条件を決定した。[結果]PET28B-FGF20原核発現ベクターを構築し、FGF20タンパクの発現を実現し、最適な発現条件を確定した。培地は20%の体積で,OD_(600)=0.4に成長し,最終濃度は1.0MMOL/LのIPTGを添加し,37°Cで6時間誘導した。培地の最適成分は以下の通りであった。ペプトン11G/L,酵母エキス5G/L,塩化ナトリウム10G/L,グルコース0G/Lであった。[結論]大腸菌におけるFGF20の最適発現を実現し、その遺伝子工学薬物の生産及び薬用研究に基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
分類
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微生物酵素の生産  ,  抗原・抗体・補体の生産と応用 

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