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J-GLOBAL ID：201702215464574381   整理番号：17A1590801

組換え型アデノウイルスpCMV-NM23-IRES-EGFPベクターの構築と同定を,組換え型アデノウイルスpCMV-NM-3-IRES-EGFPベクターの構築と同定のために行った。【JST・京大機械翻訳】

Construction and identification of recombinant adenovirus pCMV-NM23-IRES-EGFP

著者 (3件)： Ceng Li (遵義医学院附属医院 病理科,貴州 遵義,563099) ,  Tang Zefei (遵義医学院附属医院 病理科,貴州 遵義,563099) ,  Li Chunming (遵義医学院附属医院 病理科,貴州 遵義,563099)
資料名： Zunyi Yixue Yuan Xuebao  (Zunyi Yixue Yuan Xuebao)
巻： 40  号： 2  ページ： 166-171  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3596A  ISSN： 1000-2715  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】ヒト胃癌細胞株BGC-823のアポトーシスに及ぼす組換え型アデノウイルスベクターを構築し,その効果を観察する。【方法】NM23遺伝子をプラスミドNM23-PIRES2-EGFPによって増幅し,PCRによって増幅し,アデノウイルスベクターpCMV-MCS-IRES-EGFPにクローン化した。組換え型アデノウイルスベクターpCMV-NM23-IRES-EGFPを構築し,制限酵素消化と遺伝子配列決定により確認した。【方法】ヒト胃癌細胞株BGC-823を,実験群(NM23-OE群,pCMV-NM23-IRES-EGFP),ブランク群(Ctrl群),陰性対照群(NC群,pCMV-MCS-IRES-EGFP)に割り付けた。3つの群の細胞におけるNM23mRNAと蛋白質の発現は,Real Time PCRとウエスタンブロット法によって検出した。 3 細胞におけるタンパク質の発現は,ウエスタンブロット法によって検出した。3群のアポトーシス率をフローサイトメトリーにより検出した。【結果】組換え型アデノウイルスpCMV-NM-3-IRES-EGFPを,制限酵素消化と遺伝子配列決定によって首尾よく構築したことが確認されていることが確認されたことが確認されたことが確認された。増幅後,組換えアデノウイルスの力価は4.0×1010 uu/mLであった。RT-PCRとWestern blotの結果によると、陰性対照群は空白群と比べ、統計学的有意差が認められなかった(P>0.05)が、実験群のNM23のmRNAとタンパク発現はその他の2群より明らかに高かった(P<0.05)。実験群のBGC-823細胞のアポトーシス率は他の2群よりも有意に高かった(P<0.05)。【結論】組換え型アデノウイルスpCMV-NM23-IRES-EGFPベクターを首尾よく構築し,NM23遺伝子発現を上方制御することにより,胃癌細胞株BGC-823のアポトーシスレベルを有意に増加させた。本研究の目的は,ヒト胃癌細胞の生物学的機能に及ぼすNM23遺伝子の影響を研究するための実験的基礎を提供することである。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： RT-PCR法 ,  アポトーシス ,  遺伝子発現 ,  タンパク質 ,  *ベクター ,  ウェスタンブロット法 ,  ヒト ,  DNA制限酵素 ,  mRNA ,  遺伝子
準シソーラス用語： 遺伝子配列 ,  アデノウイルスベクター ,  *組換体 ,  *EGFP ,  *IRES , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： NM23 ,  vector ,  BGC-823 ,  adenovirus ,  apoptosis

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  腫ようの化学・生化学・病理学  (GE02030N)

タイトルに関連する用語 (4件)： 組換え型アデノウイルス ,  ベクター ,  構築 ,  同定