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J-GLOBAL ID:201702215612340879   整理番号:17A0748517

多重タッチダウンPCRアッセイによる血液培養陽性ボトルからのmecA,bla_SHV,bla_CTX-M,bla_TEMとbla_OXA遺伝子の直接検出【Powered by NICT】

Direct detection of mecA, blaSHV, blaCTX -M, blaTEM and blaOXA genes from positive blood culture bottles by multiplex-touchdown PCR assay
著者 (8件):
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巻: 64  号:ページ: 138-143  発行年: 2017年 
JST資料番号: C0081C  ISSN: 0266-8254  CODEN: LAMIE7  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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メチシリン耐性ブドウ球菌(MRS)およびESBL(基質特異性拡張型βラクタマーゼ)産生細菌は敗血症における最も重要な抵抗性病原体である。本研究では,新しい多重タッチダウンPCR法(MT PCR)は血液培養陽性ボトルからmecA,bla_SHV,bla_CTX-M,bla_TEMとbla_OXA遺伝子の存在を迅速かつ同時に検出するために開発した。技術はmecA検出のための10~3CFU ml~ 1と他の遺伝子の10~2CFU ml~ 1の感度,全遺伝子の検出における100%の特異性を示した。全遺伝子は参照株で人工的に汚染したスパイクした血液培養ボトルで検出された。三メチシリン耐性S.aureus(MRSA),二メチシリン耐性S.epidermidis(MRSE)と32ESBL産生細菌は標準微生物学的方法による48時間の臨床血液培養試料から単離した。対応する遺伝子は三株のMRSA,二MRSEと29MT PCRアッセイによる4時間の臨床血液培養試料からのESBL産生腸内細菌の直接検出された。bla_SHV,bla_CTX-M,bla_TEMとbla_OXA遺伝子のどれも,病原体における他のESBL遺伝子型のために,ESBL産生細菌と他の三種のボトルで検出された。同様に,培養による負の証明されたすべてのボトルをPCRにより負のままであった。提案した方法は,迅速,高感度かつ特異的であり,MRSの遺伝子と血液培養ボトルからのESBL産生菌を直接検出することができた。研究の意義と影響:耐性遺伝子検出のためのPCRの開発に関する多くの研究が既に報告されている多重PCR法を含んでいる。しかし,交差増幅反応は,多重PCR法における主要な関心事である。本研究では,血液培養陽性ボトルからmecA,bla_SHV,bla_CTX-M,bla_TEMとbla_OXA遺伝子の同時検出のための高感度かつ特異的多重タッチダウンPCRアッセイを開発し,交差増幅は存在せず,偽陽性結果は得られなかった。Copyright 2017 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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微生物検査法 

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