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J-GLOBAL ID:201702218703403939   整理番号:17A0707863

ヒト血管細胞におけるHCREG1遺伝子プロモーターは血清飢餓に応答する。【JST・京大機械翻訳】

Response of CREG1 promoter to serum starvation in human vascular cells
著者 (8件):
資料名:
巻: 24  号:ページ: 1483-1489  発行年: 2008年08月15日 
JST資料番号: W1465A  ISSN: 1000-4718  CODEN: ZBSZEB  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的;E1A活性化遺伝子遺伝子(CREG1)のヒト血管平滑筋細胞(VSMCS)とヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVECS)における発現の制御機序を明らかにするため、ヒトCREG1(HCREG1)プロモーターレポーター遺伝子ベクターを構築した。異なる血管細胞におけるCREG1の発現を検討した。方法;HCREG1のバイオインフォマティクス解析に基づき,人1遺伝子の上流-3677BPの配列を,ヒトのゲノムDNAを鋳型として,PCR法によって増幅した。HCREG15’上流-3677BP,-2310BPおよび-945BPフラグメントを構築した。これらの3つの配列をPMD18-Tベクターにクローニングし,PEGFP-1-P3677,PEGFP-HCREG1-P2310およびPEGFP-HCREG1-P945にサブクローニングした。組換えプラスミドを,VSMCSとHUVECSに形質移入し,緑色蛍光蛋白質(GFP)の発現を検出した。【結果】;配列決定により、3つのレポーター遺伝子ベクターに挿入されたPCR増幅配列はいずれもHCREG1遺伝子の上流DNA配列と完全に整合していることが確認された。IN VITROで培養したヒトVSMCSとHUVECSをトランスフェクションした後、蛍光観察とウェスタンブロット法(WESTERN BLOTTING)により、細胞内にGFPの発現が存在することが確認された。また0.5%FBSで培養したHITASY細胞でGFP発現は10%FBS培養した細胞より有意に増加した。HU-VECSにおけるGFP発現はヒトVSMCSよりも有意に増加した。結論;HCREG1遺伝子プロモーターレポーター遺伝子ベクターの構築に成功し、コアプロモーターは5’上流配列の-945BP-0BP領域に存在し、鑑定-段階はHCREG1遺伝子発現の研究に条件を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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循環系の基礎医学 
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