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J-GLOBAL ID：201702221105869967   整理番号：17A1323950

野生型キヌレニン発現ベクターの構築と酵素活性検出【JST・京大機械翻訳】

Construction of wild kynureninase expression vector and determination of kynureninase activity

著者 (5件)： Chen Jie (浙江大学医学院附属儿童医院心内科, 杭州,310051) ,  Chen Wendong (上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血圧研究所高血圧科) ,  Ji Kaida (上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血圧研究所高血圧科) ,  Gao Pingjin (上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血圧研究所高血圧科) ,  Zhu Dingliang (上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血圧研究所高血圧科)
資料名： Zhongguo Yaowu yu Linchuang  (Zhongguo Yaowu yu Linchuang)
巻： 17  号： 4  ページ： 465-467,insert1  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3321A  ISSN： 1671-2560  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】野生型イヌにおけるウロキナーゼ(KYNU)の真核生物発現ベクターを構築し,HEK293細胞におけるその発現とその酵素活性を分析する。方法:ヒト肝細胞の総RNAを抽出し、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)法によりKYNU遺伝子の全長cDNA-NAを獲得し、野生型KYNU遺伝子をpcDNAベクターにクローンし、野生型pcDNA-KYNU組換え発現プラスミドを獲得した。制限酵素消化と配列決定によりHEK293細胞にトランスフェクションし、ウェスタンブロット法により野生型KYNUの細胞中の発現を検出し、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)によりHEK293細胞に発現する野生型KYNU酵素タンパクの活性を測定した。【結果】野生型pcDNA-KYNUの発現プラスミドをPCRにより同定し,組換え野生型cDNA-KYNUプラスミドをトランスフェクトしたHEK293細胞においてKYNU蛋白質を発現させることができることが示された。HPLCの結果は野生型KYNU酵素の活性があることを示した。結論:野生型pcDNA-KYNUの真核生物発現ベクターを構築することに成功し、野生型組み換えプラスミドはHEK293細胞においてKYNUを発現でき、一定の酵素活性を有する。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： プラスミド ,  トランスフェクション ,  cDNA ,  *酵素活性度 ,  タンパク質 ,  ウェスタンブロット法 ,  *ベクター ,  真核生物 ,  DNA制限酵素 ,  RT-PCR法 ,  *野生型 ,  高速液体クロマトグラフィー ,  HEK293細胞 ,  遺伝子
準シソーラス用語： *発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Kynureninase ,  Wild-type ,  Hypertension ,  High performance liquid chromatography

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (5件)： 野生型 ,  キヌレニン ,  発現ベクター ,  構築 ,  酵素活性