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J-GLOBAL ID:201702222109252427   整理番号:17A1890759

hSesn1遺伝子の真核生物発現ベクターの構築と蛋白質の発現と局在化【JST・京大機械翻訳】

Construction of Eukaryotic Plasmid of Human hSesn1 Gene and Expression and Localization of Fusion Protein
著者 (8件):
資料名:
巻: 46  号:ページ: 41-44  発行年: 2017年 
JST資料番号: C3951A  ISSN: 1673-548X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】ヒトSesn1真核細胞発現ベクターを構築し,COS-7細胞系における融合蛋白質の発現と局在を検出する。【方法】HeLa細胞のmRNAを抽出し,逆転写によりcDNAに変換した。ヒトSesn1遺伝子の完全長cDNA断片をポリメラーゼ連鎖反応により増幅し,pEGFP-C1真核細胞発現ベクターにクローン化した。さらに、構築した組換え発現ベクターをダブル酵素消化及び配列決定により同定し、その後、ツール細胞株COS-7にトランスフェクションし、Western blot法による測定を行った。最後に,共焦点レーザー走査顕微鏡を用いて,COS-7細胞におけるpEGFP-hSesn1の局在性を観察した。【結果】hSesn1遺伝子の完全長cDNAフラグメントをpEGFP-C1真核細胞発現ベクターにクローン化し,配列決定により1479bpフラグメントを確認し,ウェスタンブロット法によりGFP-hSesn1融合蛋白質の発現を検出した。分子質量(Mr)は約80kDa.pEGFP-hSesn1はCOS-7細胞において主に細胞質と核周囲に局在する。結論:pEGFP-hSesn1真核細胞発現ベクターを成功裏に構築し,融合蛋白質の発現を検出し,COS-7細胞において主に核周囲及び細胞質に局在する。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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遺伝子操作 

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