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J-GLOBAL ID：201702223111276861   整理番号：17A1855516

pGV141-ROCK2真核細胞発現ベクターの構築とその血管内皮細胞における発現【JST・京大機械翻訳】

Construction of Eukaryotic Expression Plasmid pGV141-ROCK2 and Expression in Vascular Endothelial Cells

著者 (10件)： Zhang Lijun (第四軍医大学学員一旅,陜西西安,710032) ,  Xu Qin (第四軍医大学学員一旅,陜西西安,710032) ,  Chu Mengyang (第四軍医大学学員一旅,陜西西安,710032) ,  Li Chengfei (第四軍医大学航空航天医学系航空航天生物動力学教研室,陜西西安,710032) ,  Shi Fei (第四軍医大学航空航天医学系航空航天生物動力学教研室,陜西西安,710032) ,  Gao Yuan (第四軍医大学航空航天医学系航空航天生物動力学教研室,陜西西安,710032) ,  Sun Xiqing (第四軍医大学航空航天医学系航空航天生物動力学教研室,陜西西安,710032) ,  Zhao Jiangdong (第四軍医大学航空航天医学系航空航天生物動力学教研室,陜西西安,710032) ,  Yan Ming (第四軍医大学西京医院骨科,陜西西安,710032) ,  Wang Yongchun (第四軍医大学航空航天医学系航空航天生物動力学教研室,陜西西安,710032)
資料名： Guizhou Yike Daxue Xuebao  (Guizhou Yike Daxue Xuebao)
巻： 42  号： 6  ページ： 635-638  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3568A  ISSN： 2096-8388  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的;【目的】ヒトの臍帯静脈内皮細胞(HUVEC-C)におけるpGV141-ROCK2の真核生物発現ベクターを構築するために,Rho関連のコイルドコイル形成蛋白質キナーゼ(ROCK)遺伝子をクローン化し,ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC-C)におけるその発現を観察する。方法;RT-PCR法により、CKCK2遺伝子のCDS領域を獲得し、XhoI、KpnIによるダブル酵素消化後、pGV141ベクターに接続した。構築したpGV141-ROCK2真核細胞発現ベクターを,PCR,二重酵素消化および配列決定によって同定し,それをHUVEC-Cに形質移入した。ウェスタンブロット法を用いて,トランスフェクション後のHUVECにおけるROCK2蛋白質の発現を検出した。結果;PCR法と二重酵素消化法により検出された標的バンドは標的バンドのサイズと一致し、配列決定結果により、組換えプラスミドに挿入されたROCK2遺伝子配列はGenBankコードのコーディング領域と完全に一致していることが分かった。組換えプラスミドをトランスフェクションしていないHUVE-Cと比較して,pGV141-ROCK2ベクターをトランスフェクションしたHUVECCにおけるROCK2蛋白質の発現は,有意に増加した(P<0.05)。結論;pGV141-ROCK2真核細胞発現ベクターを成功裏に構築し、体外でヒトHUVE-Cをトランスフェクションした後、ROCK2タンパク発現を著しく増加させることができた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ヒト ,  *ベクター ,  ウェスタンブロット法 ,  酵素的分解 ,  *真核細胞 ,  PCR法 ,  遺伝子 ,  トランスフェクション ,  タンパク質 ,  プラスミド ,  タンパク質キナーゼ ,  *血管内皮細胞
準シソーラス用語： *ROCK ,  *発現ベクター ,  *Rhoキナーゼ2 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： plasmid ,  vector ,  endothelial cells ,  Rho associated coiled coil forming protein kinase

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (5件)： 真核細胞 ,  発現ベクター ,  構築 ,  血管内皮細胞 ,  発現