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J-GLOBAL ID：201702224060339612   整理番号：17A1958969

初期ニワトリはいにおける機能喪失のためのCRISPR/Cas9ゲノム編集の最適化【Powered by NICT】

Optimization of CRISPR/Cas9 genome editing for loss-of-function in the early chick embryo

著者 (4件)： Gandhi Shashank (Division of Biology and Biological Engineering, California Institute of Technology, Pasadena, CA 91125, United States) ,  Piacentino Michael L. (Division of Biology and Biological Engineering, California Institute of Technology, Pasadena, CA 91125, United States) ,  Vieceli Felipe M. (Division of Biology and Biological Engineering, California Institute of Technology, Pasadena, CA 91125, United States) ,  Bronner Marianne E. (Division of Biology and Biological Engineering, California Institute of Technology, Pasadena, CA 91125, United States)
資料名： Developmental Biology  (Developmental Biology)
巻： 432  号： 1  ページ： 86-97  発行年： 2017年 
JST資料番号： C0522A  ISSN： 0012-1606  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： CRISPR/Cas9の出現は,事実上あらゆる生物における可能なゲノム編集,遺伝的操作に適したものを含むを行ってきた。,3倍戦略を介して効率を改善した初期鳥類はいへの応用のためのCRISPR/Cas9の最適化を提示した。第一に,著者らは改善された核局在化のための二核局在化シグナル配列と隣接Cas9蛋白質を用いた。第二に,転写と不安定Cas9gRNA相互作用の早期終結を回避する修正ガイドRNA(gRNA)足場を用いた。第三に,以前に利用されヒトU6より4倍高いgRNA発現をもたらすことをニワトリ特異的なU6プロモーターを用いた。in vivo応用のためのg RNAの迅速スクリーニングのために,Cas9を構成的に発現するニワトリ線維芽細胞細胞系を作成した。原理の証明として,神経堤発生中の既知の機能を持つノックアウトPax7とSox10,重要な転写因子に対する初期ニワトリはいにおけるエレクトロポレーションベース機能喪失研究を行った。結果はCRISPR/Cas9介在性欠失は,それぞれの蛋白質と転写物の損失だけでなく,予測された下流標的をもたらすことを示した。総合すれば,結果は再現性があり,ロバストで特異的な様式でニワトリ胚における標的化遺伝子ノックアウトのためのこの最適化されたCRISPR/Cas9法の有用性を明らかにした。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： スクリーニング ,  プロモーター領域 ,  RNA【核酸】 ,  相互作用 ,  タンパク質 ,  転写因子 ,  線維芽細胞 ,  ターゲティング ,  ヒト ,  *最適化 ,  再現性
準シソーラス用語： 細胞株 ,  核局在化 ,  *Cas9 ,  *CRISPR配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： CRISPR/Cas9 ,  ニワトリ胚 ,  gRNA ,  神経冠 ,  ノックアウト

分類 (1件)： 発生と分化  (EJ16020W)

タイトルに関連する用語 (6件)： 初期 ,  ニワトリはい ,  CRISPR ,  Cas9 ,  ゲノム編集 ,  最適化