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J-GLOBAL ID：201702224491339860   整理番号：17A1215616

M1受容体を安定的に発現する培養細胞を用いた血清抗コリン活性を評価するための改良された高効率分析【Powered by NICT】

An improved, high-efficiency assay for assessing serum anticholinergic activity using cultured cells stably expressing M1 receptors

著者 (8件)： Nobrega Jose N. (Behavioural Neurobiology Laboratory, Research Imaging Centre, Centre for Addiction and Mental Health, Toronto, ON, Canada) ,  Nobrega Jose N. (Department of Psychiatry, University of Toronto, Toronto, ON, Canada) ,  Nobrega Jose N. (Departments of Psychology and Pharmacology & Toxicology, University of Toronto, Canada) ,  Nobrega Jose N. (Campbell Family Mental Health Research Institute, Centre for Addiction and Mental Health, Toronto, ON, Canada) ,  Raymond Roger J. (Behavioural Neurobiology Laboratory, Research Imaging Centre, Centre for Addiction and Mental Health, Toronto, ON, Canada) ,  Pollock Bruce G. (Department of Psychiatry, University of Toronto, Toronto, ON, Canada) ,  Pollock Bruce G. (Institute of Medical Sciences, University of Toronto, Canada) ,  Pollock Bruce G. (Campbell Family Mental Health Research Institute, Centre for Addiction and Mental Health, Toronto, ON, Canada)
資料名： Journal of Pharmacological and Toxicological Methods  (Journal of Pharmacological and Toxicological Methods)
巻： 86  ページ： 28-33  発行年： 2017年 
JST資料番号： A0132B  ISSN： 1056-8719  CODEN： JPTMEZ  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 血清中の全抗コリン活性(SAA)の評価は,高齢者と他の集団での多種薬剤状態に関連した認知障害におけるその潜在的関与に非常に重要である。このような推定はラット脳組織における放射性リガンド結合の変位に基づいている。そのような測定の有効性は疑問視されている,大きな血清蛋白質の潜在的に歪ませる効果を確認した。をより効率的にし,この可能性のある混乱の自由であることを修飾したアッセイを開発しようとした。M1受容体M1WT3を安定して発現する培養CHO細胞を用いた。~3時間放射性リガンドの結合は96穴プレートで行い,既知量の抗コリン薬を含む血清で試験した。内因性血清蛋白質の影響を試験は前ろ過と過塩素酸(PCA)による脱タンパクによって評価した。[~3H〕キヌクリジニルベンジラート([~3H]QNB)または[~3H]N-メチル-スコポラミン([~3H]NMS)の結合M1WT3細胞は抗コリン薬の濃度変化に対する信頼性と等しく敏感であるとわかった。以前の知見(Cox,Kwatra,Shetty,Kwatra,2009)と一致して,50kDaより重い蛋白質のフィルタリングは,本質的にSAA値を零に低下させる。とは対照的に,PCAは結合見られる未処理細胞膜の70%以上を保持していた。細胞に基づく分析は,従来のラット脳に基づくプロトコルと比較して顕著な信号増加を示した。ここで記述した細胞に基づくプロトコルの更なる利点は,増加した感度と信頼性,必要な放射性リガンドの量が小さく,高いスループットを含んでいる。PCA前処理は,血清蛋白質に起因する潜在的アーチファクトを除去した。段階,効率の改善と共に,アッセイの有用性に大いに寄与する。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： *培養 ,  プロトコル ,  *M1受容体 ,  信頼性 ,  CHO細胞 ,  *性能分析 ,  スループット ,  老人 ,  前処理 ,  血清タンパク質 ,  *血清 ,  細胞膜 ,  抗コリン作動薬
準シソーラス用語： 放射性リガンド ,  *抗コリン作用 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： 抗コリン負担 ,  [~3H]QNB ,  [~3H]NMS ,  M1受容体 ,  M1WT3細胞株 ,  SAA

分類 (3件)： 薬物の研究法  (GV01020U) ,  生物薬剤学(基礎)  (GY01021U) ,  細胞・組織培養法  (EA03040R)

タイトルに関連する用語 (7件)： M1受容体 ,  発現 ,  培養細胞 ,  血清 ,  抗コリン活性 ,  評価 ,  効率分析