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J-GLOBAL ID:201702225537122282   整理番号:17A1498170

成人心室筋細胞の新しい大粒子FACS精製は正常な離乳後発育における細胞の大きさとプロテオームへのミオシンとアクチン不均衡の蓄積を明らかにする【Powered by NICT】

Novel large-particle FACS purification of adult ventricular myocytes reveals accumulation of myosin and actin disproportionate to cell size and proteome in normal post-weaning development
著者 (13件):
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巻: 111  ページ: 114-122  発行年: 2017年 
JST資料番号: E0538A  ISSN: 0022-2828  CODEN: JMCDAY  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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心室筋細胞(MCs)の定量化細胞蛋白質は組織不均一性と心臓における細胞サイズの多様性のために困難である。離乳後心臓個体発生では,棒状MCは心臓重量の大部分を構成している数の心筋細胞の少数を残した。心臓蛋白質の生化学的解析は,通常,発達中の組織で細胞型またはサイズにMC特異的蛋白質の含有量を良く相関しない。成人棒状MCsの精製のための新しい大粒子蛍光活性化細胞選別(LP FACS)戦略を開発すること。このアプローチはMCプロテオームとサルコメア蛋白質(すなわちミオシン重鎖(MyHC)とアルファ-アクチン(α-アクチン))含有量の細胞あたりの成長スケール測定可能にするために開発した。個々の心筋細胞は2194日齢マウスから単離した。200μmのノズルを備えたLP FACSジェットにおける空気システムは成体MCsを精製するために初めて定義した。細胞型特異的免疫表現型検査及び選別は細胞形態と大きさとは独立して成体のMCsの≧95%の純度を得た。この手法は更なる解析から他の細胞型と組織汚染物質を排除した。MCプロテオーム,MyHCとα-アクチン蛋白質は細胞数に正規化線形生化学分析で測定した。相対成長係数αを用いて,蛋白質蓄積のMC比速度をスケール成長離乳した。MC比容積(α=1.02)と全体的な蛋白質蓄積(α=0.94)であった体重に比例する(すなわち等尺性)。とは対照的に,MyHCとα-アクチンは体重(それぞれ1.79と2.19)とMC量(それぞれ1.76と1.45)よりも遥かに大きな率(すなわちhyperallometric)に蓄積した。LP FACS精製MCで測定したMCプロテオームと細胞体積の変化はボディマス離乳後に比例した。反対に,MyHCとα-アクチンはMCプロテオーム蓄積,細胞拡大,または動物の成長のみから期待されるものよりも急速に集中している。LP FACSは成体MC精製のための新しい標準とMCs拡大における細胞あたりの蛋白質の特異的蛋白質または群の生化学的含有量をスケールへのアプローチを提供する。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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循環系の基礎医学  ,  心臓 
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