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J-GLOBAL ID:201702225759500560   整理番号:17A1338183

ペスト菌のゲノム修飾のための方法は確立されていない。【JST・京大機械翻訳】

Development of a high-efficient scarless genetic modification method for Yersinia pestis
著者 (9件):
資料名:
巻: 41  号:ページ: 209-212,221  発行年: 2017年 
JST資料番号: C2949A  ISSN: 1674-9960  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:ペスト菌における遺伝子組換えのない技術的なプラットフォームを構築し、ペスト菌関連遺伝子の機能と作用機序を深く研究する。方法:非対称PCR増幅により、耐性カセットの断片(修飾標的領域を含む上流の相同性腕)を増幅し、pKD46プラスミドを含むペスト菌に導入した。アラビノースの誘導により、pKD46プラスミドは相同組換えに関連する3つの酵素(Exo、BetaとGamタンパク)を発現し、組み換え後にpKSI-1プラスミドと標的遺伝子の組み換えベクターを導入し、抵抗性ボックスと2回目の相同組換えを行った。組換え型酵素とI-SceI酵素は,アラビノースとIPTGによって誘導され,組換え型の耐性カセットとpKSI-1プラスミドのI-SceI部位を制限することができて,それによって,抵抗性ボックスとプラスミドを除去することができて,無修飾の目的を達成することができた。結果と結論 ペスト菌のΔwaaAとwaaA(△9nt)の2つの突然変異株を成功に構築した。異なる実験の目的に応じて、相応の遺伝子ノックアウト方法を選択し、得られた無痕跡修飾株はペスト菌関連遺伝子の機能研究に基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (2件):
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分子遺伝学一般  ,  遺伝子操作 
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