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J-GLOBAL ID:201702226201239282   整理番号:17A0674071

【目的】SGC-7901細胞の増殖と分泌サイトカインの機能に及ぼすヘリコバクター遺伝子のクローン発現と組換え蛋白質の影響を研究する。【JST・京大機械翻訳】

Cloning and expressing cagT gene of type IV secretion system in Helicobacterpylori and influence of cytokine secretion and cell proliferation on SGC-7901 cell
著者 (8件):
資料名:
巻: 48  号:ページ: 452-458  発行年: 2008年 
JST資料番号: C2382A  ISSN: 0001-6209  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】HELICOBACTER PYLORI(HELICOBACTER PYLORI)を研究する。[方法]PCR法を用い、H.PYLORIゲノムDNAからCAGTコード遺伝子断片を増幅し、それをPQE30ベクターに挿入し、二重酵素切断同定により陽性クローンをスクリーニングした。配列決定分析により、IPTG誘導発現、発現タンパク質はNI2+-NTAカラムで精製し、WESTERN BLOTにより同定し、精製したタンパク質はSGC-7901細胞に作用し、細胞トータルRNAを抽出し、RT-PCRでIL-8を増幅した。細胞増殖に及ぼす蛋白質の影響を,MTTアッセイによって検出した。[結果]CAGT遺伝子のクローニングに成功し,GENBANKに登録された他のH.PYLORI菌株とのヌクレオチド配列相同性は97%-99%であった。SDS-PAGEは,SDS-PAGEが,32KDAの相対的分子量を持ち,NI(2+)-NTAカラムによって精製した後に,98%の組換え蛋白質を得ることができることを示した。SGC-7901細胞における蛋白質の濃度(10ΜG/ML)は,MRNA発現レベルを誘導することができた。異なる濃度のCAGTとSGC-7901細胞の作用により、細胞増殖の程度はタンパク濃度の増加に伴い次第に低下し、細胞の増殖は抑制された。【結論】CAGT蛋白質は,SGC-7901細胞におけるIL-8の発現を刺激し,細胞増殖を阻害し,その生物学的機能を研究するための基礎を提供する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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酵素一般 

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