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J-GLOBAL ID：201702227373091446   整理番号：17A1522852

マウスの遠位肺動脈平滑筋細胞の初代培養法とその機能学的特性の同定【JST・京大機械翻訳】

Primary culture and functional identification of distal pulmonary artery smooth muscle cells in mice

著者 (6件)： Li Meichan (510120,呼吸疾病国家重点実験室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院) ,  Chen Yuqin (510120,呼吸疾病国家重点実験室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院) ,  Zhang Chenting (510120,呼吸疾病国家重点実験室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院) ,  Jiang Qian (510120,呼吸疾病国家重点実験室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院) ,  Lu Wenju (510120,呼吸疾病国家重点実験室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院) ,  Wang Jian (510120,呼吸疾病国家重点実験室广州呼吸疾病研究所广州医科大学附属第一医院)
資料名： Zhonghua Jiehe he Huxi Zazhi  (Zhonghua Jiehe he Huxi Zazhi)
巻： 40  号： 2  ページ： 81-85  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2343A  ISSN： 1001-0939  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:マウスの遠位肺動脈平滑筋細胞(PASMCs)の体外分離及び初代培養方法を確立し、その機能学的特性を同定する。方法:体外顕微鏡下でマウスの遠位肺動脈平滑筋組織を分離精製し、複合酵素併用消化法により消化した後、体外培養を行った。マウスの遠位のPASMCsの成長特性を,倒立顕微鏡の下で観察した。免疫蛍光染色法により細胞を同定した。蛍光顕微鏡の下でFura-2-AM蛍光プローブによって追跡されたカルシウムイオンを観察し、細胞の高カリウム反応及びカルシウム池の操作性カルシウム内流反応を測定し、細胞の活力を評価した。【結果】初代培養マウスのPASMCsを6日間培養したとき,細胞成長の融合度は80%に達し,成長状態はより良く,典型的な谷-ピーク形状を示した。α-アクチン(α-SMA)染色の陽性率は95%以上であった。Ca(2+)濃度が60mmol/Lであったとき,PASMCsの細胞内カルシウム濃度は急速に上昇し,細胞内カルシウム濃度(Δ[Ca2+]i)は50%以上に増加したが,1時間後には有意に増加した(P<0.01)。これらの結果により,PASMCsにおける電位依存性カルシウムチャンネル(VDCC)は,マウスにおいて良好な機能を持つことが示された。カルシウムを含有するKrebs液を5分間灌流し、無カルシウムピピリン酸とNif Krebs液を10分間灌流し、カルシウム含有ピレニアル酸とNif Krebs液を10分間灌流し、カルシウム含有Krebs液を10分間灌流し、マウスの遠位PASMCsにおける基礎カルシウムとカルシウム池の操縦性カルシウム内流(SOCE)を測定した。結果によると、初代マウスの遠位PASMCsは灌流液に対して反応が良好で、カルシウムイオン濃度に二重ピークの変化が現れ、細胞中のカルシウムプールの操縦性カルシウムチャンネル(SOCC)の機能が優れていることが明らかになった。結論:本実験は複合酵素消化法による安定で信頼性のある初代マウス肺動脈平滑筋の体外培養方法を樹立し、純度が比較的高く、機能が良好なPASMCsを得ることができ、肺血管疾患の研究に良好な細胞ツールを提供した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： カルシウムチャンネル ,  アクチン ,  酵素 ,  *肺動脈 ,  酵素的分解 ,  染色 ,  *平滑筋 ,  *初代培養 ,  潅流 ,  細胞増殖 ,  蛍光顕微鏡 ,  カルシウム
準シソーラス用語： 細胞内カルシウム濃度 ,  カルシウムイオン ,  蛍光プローブ , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Myocytes ,  smooth muscle ,  Primary culture ,  Voltage-dependent calcium channel ,  Store-operated calcium channel

分類 (3件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  生物科学研究法一般  (EA03010K) ,  生体の顕微鏡観察法  (EA03050C)

タイトルに関連する用語 (4件)： マウス ,  肺動脈平滑筋細胞 ,  初代培養 ,  同定