Dictyostelium discoideumにおける最適化された発現によるヒトテトラスパニンのイソ型複雑性の低減ハイスループット機能的読出しを可能にする【Powered by NICT】

Scheltz Tineke; von Buelow Julia; Beitz Eric

文献

J-GLOBAL ID：201702231437002870 整理番号：17A1061853

Dictyostelium discoideumにおける最適化された発現によるヒトテトラスパニンのイソ型複雑性の低減ハイスループット機能的読出しを可能にする【Powered by NICT】

Reducing isoform complexity of human tetraspanins by optimized expression in Dictyostelium discoideum enables high-throughput functional read-out

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巻： 135 ページ： 8-15 発行年： 2017年
JST資料番号： W0282A ISSN： 1046-5928 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：オランダ (NLD) 言語：英語 (EN)

足場蛋白質のヒトテトラスパニンファミリーは33のイソ型から構成されている。内在性膜蛋白質で,インテグリン,免疫グロブリン,成長因子,受容体チロシンキナーゼ,プロテアーゼ,シグナル伝達蛋白質とウイルスカプシド蛋白質とのホモマー及びヘテロマー蛋白質-蛋白質相互作用を介していわゆるテトラスパニンウェブを組織化した。テトラスパニンは細胞効果を促進し,接着,移動,浸潤,シグナル伝達,膜融合,蛋白質輸送,癌進行,感染など。多重テトラスパニンイソ型とパートナー蛋白質の遍在的発現から,特異的相互作用研究を妨げている。ここでは,ヒトテトラスパニンの非ほ乳類発現系としてのDictyostelium discoideumを評価した。高容量イメージングを用いて,緑色蛍光蛋白質との融合によるD.discoideumにおけるテトラスパニンを定量化した。三ヒトテトラスパニン,CD9,CD81およびCD151,最適化を実施したテストケースとして機能した。N-及びC末端間のGFPドメイン,Kozak配列を添加し,コドン使用の適応部分的あるいは完全にを交換した。このように,CD81とCD151を成功裡に作製した。立体配座特異的抗体は,CD81とフローサイトメトリー細胞内局在を示したの正しい折畳みを確認した。これらのデータに基づいて,著者らは内因性ヒト蛋白質の干渉なしに大規模にテトラスパニン相互作用とそれらの選択的創薬可能性を研究するためのヒトパートナー蛋白質とD.discoideumベース共発現プラットフォームを想定した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

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遺伝子操作

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