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J-GLOBAL ID:201702231482478746   整理番号:17A1518263

ニワトリにおけるmiR-17-92遺伝子クラスタの標的遺伝子ZFPM2の同定と機能解析【JST・京大機械翻訳】

Identification and analysis of ZFPM2 as a target gene of miR-17-92 cluster in chicken
著者 (7件):
資料名:
巻: 39  号:ページ: 333-345  発行年: 2017年 
JST資料番号: C2546A  ISSN: 0253-9772  CODEN: ICHUDW  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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miR-17-92遺伝子クラスターは哺乳動物の多くの生理と病理過程において重要な役割を果たしている。本実験室の前期の研究により、miR-17-92遺伝子クラスターは鶏前脂肪細胞の増殖を促進するが、その作用機序はまだ不明である。miR-17-92遺伝子クラスタがニワトリ前脂肪細胞の増殖を促進する作用機序を明らかにするために、本研究ではCCK-8細胞増殖測定法を用いて、ZFPM2が前脂肪細胞に与える影響を分析した。ZFPM2の干渉は,ニワトリの前脂肪細胞の増殖を有意に促進した(P<0.01)。CCK-8分析の結果と一致し、ZFPM2の干渉は細胞増殖マーカー遺伝子PCNA、Ki67、サイクリンD1のmRNA発現量を明らかに上昇させた(P<0.01またはP<0.05)。さらに,ニワトリZFPM2遺伝子の生物情報学的分析を行った。この遺伝子のmRNAの3′UTRは2つの領域にmiR-17-92遺伝子クラスタの4つのメンバー(miR-17-5p、miR-20a、miR-19a及びmiR-19b)の潜在的結合部位が存在することが分かった。miR-17-92遺伝子クラスターは,ニワトリのZFPM2遺伝子に対する標的として作用することを証明した。ニワトリFZPM2遺伝子の3′UTR領域におけるルシフェラーゼレポーター遺伝子(野生型)(psi-CHECK2-ZFPM2-3′UTR-WT)とその突然変異型のルシフェラーゼレポーター遺伝子ベクター(psi-CHECK2-ZFPM2-3′UTR-MUT)を構築した。レポーター遺伝子の活性分析により、miR-17-92遺伝子クラスターの過剰発現は野生型ZFPM2のレポーター遺伝子活性を著しく抑制できることが分かった(P<0.01)。miR-17-5p,miR-20aおよびmiR-19aの抑制剤は,野生型ZFPM2遺伝子の活性を有意に増加させた(P<0.01またはP<0.05)。しかし,これらの抑制剤は,突然変異型ZFPM2のレポーター遺伝子の活性に影響を及ぼさないことが明らかになった。miR-17-5p、miR-19a及びmiR-20aの抑制剤は内因性ZFPM2遺伝子のmRNA発現レベルを著しく高めた(P<0.01又はP<0.05)。共トランスフェクション分析によると、差異は顕著ではないが、miR-17-5pとmiR-19aの抑制剤はいずれもZFPM2の干渉断片の細胞増殖促進作用を低下させる傾向がある。本研究結果は以下のことを示した。miR-17-92遺伝子クラスターのmiR-17-5p、miR-20a、miR-19a及びmiR-19bの標的はZFPM2に作用する。miR-17-92遺伝子クラスターはZFPM2遺伝子の発現を抑制することにより、ニワトリ前脂肪細胞の増殖を促進する。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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細胞生理一般  ,  遺伝子発現 
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