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J-GLOBAL ID:201702236689580471   整理番号:17A1521175

解糖熱セルラーゼによるキシリナーゼの分離精製とその酵素学的性質【JST・京大機械翻訳】

Purification and characterization of a thermostableβ-xylosidase from Caldicellulosiruptor saccharolyticus
著者 (6件):
資料名:
巻: 36  号:ページ: 1041-1046  発行年: 2017年 
JST資料番号: C2014A  ISSN: 1000-6613  CODEN: HUJIEK  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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生物情報学の分析により、嫌気性胞子菌Caldicellulosiruptor saccharolyticusによってコードされるキシリナーゼ(XYL39B)はグリコシドヒドロラーゼ第2ファミリーに属し、極端に耐熱な加水分解キシロオリゴ糖はキシロースのキー酵素である。XYL39B遺伝子(xyl39B)を大腸菌BL21(DE3)中に導入し,熱処理とニッケル親和性クロマトグラフィーにより純酵素を得た。精製した組換えXYL39Bの酵素学的性質の特性化により,酵素の最適反応温度は70°Cで,最適pHは6.0であることが示された。pH6.0,70°Cで2時間保持した後に,相対活性は90%以上に達し,55~75°Cの範囲では高い活性を示し,Zn2+,Cu2+,SDSは酵素活性に対して明らかな抑制効果を示した。その他の金属イオンと化学試薬はこの酵素の酵素活性に与える影響は顕著ではない。4-p-ニトロフェノール-β-D-キシロシド(pNPX)を基質として用いたとき,見かけの活性化エネルギーは14.52kJ/molであり,Kmは11.47mmol/L,Vmaxは29.4U/g,Kcatは20.60s-1であった。キシロースによるフィードバックの抑制は弱く(抑制定数は306.87mmol/L)、以上の結果は、この酵素が活性が高く、キシロースの抑制を抑制する細菌源の極端な耐熱性キシリナーゼであることを示した。研究結果は,それらの後の遺伝子改変と実用化のための理論的基礎を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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酵素一般  ,  酵素生理  ,  遺伝子発現 
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