誘導型老化細胞モデルの確立とKlothoプロモーター切断型突然変異体の構築と活性検出【JST・京大機械翻訳】

Guo Shujun; Wu Guoyi; Wang Hailong; Zhao Ying; Li Xiaoyan; Chen Xiaojia

文献

J-GLOBAL ID：201702237589946818 整理番号：17A1592810

誘導型老化細胞モデルの確立とKlothoプロモーター切断型突然変異体の構築と活性検出【JST・京大機械翻訳】

Establishment of induced senescence cell model and construction of Klotho promoter truncated mutants

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資料名：
巻： 38 号： 2 ページ： 143-149 発行年： 2017年
JST資料番号： C2941A ISSN： 1000-9965 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

目的;誘導型老化細胞モデルを確立し、抗老化に関連するKlotho遺伝子プロモーターの異なる切断型突然変異体の活性を測定し、次の研究に基礎を築いた。方法;初代ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)をフローサイトメトリーにより分離し,異なる過酸化水素濃度を設定した。時間勾配により、初代HUVEC細胞老化の条件を誘導し、最終的にSA-β-gal染色及び定量PCR技術により、その誘導条件を確定した。全長のKlothoプロモーターをテンプレートとし、PCRの方法により、異なる長さのKlothoプロモーター切断型突然変異体を獲得し、二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子系検出キットを用いて、異なるプロモーター切断型突然変異体の誘導型老化細胞内の活性化程度を測定した。結果;培地中の過酸化水素濃度600μM,96時間の処理後,誘導型老化細胞モデルを構築することに成功した。PCR法により、長さがそれぞれ1711bp、1262bp、785bpと735bpの4つの長さの短縮型突然変異体を構築し、735bpの切断型突然変異体が誘導型老化細胞内の活性化程度に明らかな差異があることを発見した。結論;誘導型老化細胞モデルの樹立に成功し、Klotho遺伝子のプロモーター切断型突然変異体の構築に成功し、これらの突然変異体が誘導型老化細胞内の活性化程度に明らかな差異があることを発見し、老化関連疾患の更なる治療のために良好な基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

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著者キーワード (4件)： , , ,

生化学的分析法 , バイオアッセイ

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