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J-GLOBAL ID：201702237919741725   整理番号：17A1132550

ワクシニアウイルス産生のための合成生物学プラットフォームの確立要素:CV-1細胞のBioBrick設計,無血清ウイルス産生およびマイクロキャリアをベースとした栽培【Powered by NICT】

Establishing elements of a synthetic biology platform for Vaccinia virus production: BioBrick design, serum-free virus production and microcarrier-based cultivation of CV-1 cells

著者 (6件)： Liu Shuchang (Department of Biochemical Engineering, University College London, Bernard Katz Building, London WC1E 6BT, UK) ,  Liu Shuchang (Barts Cancer Institute, Queen Mary University of London, London EC1 M 6BQ, UK) ,  Ruban Ludmila (Department of Biochemical Engineering, University College London, Bernard Katz Building, London WC1E 6BT, UK) ,  Wang Yaohe (Barts Cancer Institute, Queen Mary University of London, London EC1 M 6BQ, UK) ,  Zhou Yuhong (Department of Biochemical Engineering, University College London, Bernard Katz Building, London WC1E 6BT, UK) ,  Nesbeth Darren N. (Department of Biochemical Engineering, University College London, Bernard Katz Building, London WC1E 6BT, UK)
資料名： Heliyon  (Heliyon)
巻： 3  号： 2  ページ： ROMBUNNO.2017.e00238  発行年： 2017年 
JST資料番号： W3098A  ISSN： 2405-8440  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ワクシニアウイルス(VACV)はワクチン接種のための確立されたベクトルであり抗腫瘍薬として有効始めている。VACVの工業生産はゲノム工学と標準化における合成生物学により成された進展から将来の利益を得る。CV-1細胞株はVACV伝搬に利用でき,VACVゲノムの正確な編集を作るためのCRISPR/Cas9システムで広く使用されている。ここでは,標準化された生物学的ツールと無血清細胞培養を特徴とするCV-1細胞とVACV生産のためのスケーラブルな合成生物学プラットホームを確立に向って第一歩を踏み出す。VACVへの導入遺伝子挿入のための新しいBioBrickプラスミドバックボーンフォーマットを提案した。を無血清プロセスにおけるVACV,VACVL,15RFP,従来の組換Lister株の伝搬におけるCV-1細胞の性能を試験した。5%ウシ胎児血清中で増殖したCV-1細胞(FBS)Dulbecco’s Modified Eagle培地(DMEM)はOptiPROとVPSFMブランド無血清培地での増殖に適応させた。0.047H~( 1)と0.044時間~( 1)の比増殖率はそれぞれOptiPROとVPSFMに適応した細胞で観察され,5%FBS DMEM中で0.035時間~( 1)と比較した。OptiPROと5%FBS DMEMに適応した細胞は回収率96%以上を達成し,凍結保存へのロバスト性の適応。VPSFMに順応した細胞は82%の回収率を示した。伝搬関数細胞当たりのプラーク形成単位(PFU)として測定し,静置培養でのウイルス生産性は5%FBS DMEMでは細胞について75PFU/細胞であった。VPSFMとOptiPRO適応は150PFU/細胞と350VACV産生を増加させたPFU/細胞であった。OptiPRO適応細胞からブーストPFU/細胞は5%FBS DMEMまたはOptiPRO培地は感染段階で観察された場合と力価は5%FBS DMEMまたはOptiPRO培地に適応した細胞を用いて測定した時に持続した。OptiPRO適応CV-1細胞を成功裏に将来のスケールアップ研究の情報を得るためにサイトデックスマイクロキャリアを用いて培養した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： ロバスト性 ,  標準化 ,  無血清培地 ,  抗腫瘍薬 ,  *ワクシニアウイルス ,  回収率 ,  感染 ,  予防接種 ,  スケールアップ ,  凍結保存 ,  細胞培養 ,  *血清 ,  ゲノム
準シソーラス用語： Dulbecco変法イーグル培地 ,  *マイクロキャリア , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 生物学的科学 ,  生化学 ,  生体工学 ,  細胞生物学 ,  微生物学歴史

分類 (2件)： 免疫療法薬・血液製剤の基礎研究  (GW22010D) ,  感染免疫  (ED03030P)

タイトルに関連する用語 (11件)： ワクシニアウイルス ,  合成生物学 ,  プラットフォーム ,  要素 ,  CV-1 ,  細胞 ,  設計 ,  血清 ,  ウイルス ,  キャリア ,  栽培