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J-GLOBAL ID:201702238505876603   整理番号:17A0109814

トランスジェニック阿Er巴 斯白Rongヤギの外因性遺伝子発現と外来遺伝子発現の間の関係を研究した。【JST・京大機械翻訳】

The Relationship Between Exogenous DsRed Gene Copy Number and Exogenous Gene Expression in Transgenic Arbas Cashmere Goats(Capra hircus)
著者 (8件):
資料名:
巻: 24  号:ページ: 871-880  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2715A  ISSN: 1674-7968  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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遺伝子組み換え動物の外因性遺伝子は体細胞クローンと胚移植の方法を用い、発現ベクターを細胞に導入した後に獲得し、多くはランダムに統合した形で受容体動物のゲノムに存在する。トランスジェニック動物における外来遺伝子の統合コピー数は外来遺伝子発現レベル及び遺伝安定性に影響する重要な要素の一つであり、遺伝子組換え動物の遺伝安定性の鑑定指標として、生存した遺伝子組換え動物を獲得した後に、その外来遺伝子コピー数を測定する必要がある。遺伝子組換え阿Er巴 斯白Rong 遺伝子(ヤギ HIRCUS)遺伝子遺伝子の赤色蛍光タンパク質(RED FLUORESCENCE PROTEIN FROM DISCOSOMA SP.,DSRED)遺伝子のコピー数とその発現量の間に一定の関係があるかどうかを研究する。本研究では、外因性遺伝子コピー数を同定する従来の方法であるDNAインプリント法(SOUTHERN BLOT)より、高効率、高感度、高精度の絶対定量QRT-PCR法を用いて、6匹のトランスジェニックヤギの外因性DSRED遺伝子発現の3つの異なる断片のコピー数を測定した。結果は,外因性遺伝子の3つのフラグメントのコピー数が,サイトメガロウイルス(CMV)のプロモーターであることを示した。2.80±0.38~13.68±0.16;DSRED遺伝子;1.34±0.04~11.84±0.02;CMVプロモーターはDSREDと接続される。1.58±0.04~19.22±0.38。6つのトランスジェニックヤギの外因性DSRED遺伝子のMRNA発現をQRT-PCR法によって検出し,3つの異なる部分のコピー数データをSPSSソフトウェアによって分析し,相関係数Pの結果は以下の通りであった。CMVプロモーターはP=0.763であった。DSRED遺伝子はP=0.665であった。CMVプロモーターとDSRED接合部はP=0.803で、3群のP値はいずれも0.05より大きく、有意な相関はなかった。これらの結果は,検出された6つのトランスジェニック阿Er巴ヤギにおける外因性CMVプロモーターによって誘発されたDSRED遺伝子の発現量は,トランスジェニックカシミアヤギのゲノム内のコピー数と有意な相関がないことを示した。また、絶対定量QRT-PCR法が大型遺伝子組み換え家畜の外来遺伝子コピー数の研究における信頼性を検証した。その再現性は良く、誤差はコントロールでき、遺伝子組み換え動物の外来遺伝子コピー数を測定する第一選択方法となりうる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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実験用生物  ,  遺伝子操作 

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