抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】in vitroでのSprague-Dawley(SD)ラットの骨芽細胞(OBs)の増殖,分化,および無機化に及ぼす種々の濃度の末梢血清の影響を研究するために,in vitroでの骨芽細胞(OBs)の増殖と分化に及ぼす異なる濃度の末梢血の影響を研究する。【方法】(1)新生児SDラットの頭蓋骨芽細胞を,付着培養法によって分離し,培養した。異なる濃度(10-5mol/L,10-6mol/L,10-7mol/L,10-8mol/L,10-9mol/L,0mol/L)の血清中の細胞を,細胞形態と蛍光染色法によって分析した。。P3の細胞培養液に,それぞれ,10mg/L,10-8mol/L,10-9mol/L,0mol/Lの血清を加えた。(3)5日目にMTT法を用いて、異なる介入濃度による増殖への影響を反映した。(4)アルカリ性ホスファターゼ(ALP)レベルと免疫蛍光法によりI型コラーゲンのレベルを測定し,異なるレベルの介入濃度が分化に与える影響を反映するために,それぞれ,酵素免疫測定法を用いて,10日目に,コラーゲンIのレベルを測定した。(5)15日目にELISA法によりオステオカルシン(OCN)のレベルを測定し、異なるレベルの介入濃度による鉱化作用に対する影響を反映した。データを収集し、SPSS 20.0統計ソフトを用いて分析を行った。計量資料は平均数±標準偏差(x±s)で表し、異なる群間の比較は単変量分散分析を採用し、多群間の比較はLSD-t検定を採用し、P<0.05表は統計学的有意差があった。結果:異なる濃度(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L、0mol/L)の血清で介入し、MTT法により測定した平均光密度値はそれぞれ以下の通りであった。対照群と比較して,それぞれ,0.400±0.028,0.379±0.023,0.379±0.047,0.401±0.038,0.420±0.038,0.618±0.064であった(すべてのP<0.01)ことが,対照群と比較して,有意差があった(P<0.01)。統計的有意差が認められた(P<0.05)。ALPの平均レベルは,微量酵素標識法によって測定した。ブランク対照群と比較して,0.046±0.002,0.017±0.002,0.026±0.002,0.046±0.002,0.051±0.002,0.073±0.003で,すべての群において有意差が認められた。統計的有意差が認められた(P<0.05)。免疫蛍光法によるI型コラーゲンの平均レベルは,以下の通りであった。それは,45.581±6.378,33.110±1.161,23.327±0.784,15.731±2.243,27.331±2.430,33.592±2.684であった。10~6mol/L群以外の任意の群は空白対照群と比較し、統計学的有意差が認められた(P<0.05)。OCNの平均レベルは,ELISAによって測定した。ブランク対照群と比較して,それぞれ,3.002±1.639,1.711±0.370,2.193±0.551,2.439±1.469,2.703±1.175,8.021±3.036であった。統計的有意差が認められた(P<0.05)。結論:異なる濃度の血清はいずれも体外骨芽細胞の増殖、分化と鉱化を抑制でき、しかも抑制作用は血清濃度の増加に伴い、先に強い後に弱い関係がある。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】