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J-GLOBAL ID:201702238949376706   整理番号:17A0936544

重合ニッキング反応と酵素増幅による高感度DNAメチルトランスフェラーゼ活性検出のための血糖測定器ベース戦略【Powered by NICT】

A glucometer-based strategy for sensitive DNA methyltransferase activity detection via a polymerization nicking reaction and enzyme amplification
著者 (2件):
資料名:
巻:号: 20  ページ: 2933-2938  発行年: 2017年 
JST資料番号: W2324A  ISSN: 1759-9660  CODEN: AMNECT  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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DNAメチルトランスフェラーゼ(MTアーゼ)は多くの生物学的過程におけるDNAメチル化レベルと密接に関係し,悪性腫瘍の他の徴候と癌治療における治療標的に先立って発生する予測癌バイオマーカーとして認識されている。,DNA MTase活性を検出するための簡単かつ高感度法を開発することは重要である。重合ニッキング反応(PNR)に基づくDNA MTase活性の簡単で高感度な検出と信号変換器としてグルコメーターを用いてインベルターゼ酵素増幅のための二重増幅戦略を提案した。中間DNA配列を生成する鋳型として三官能性dsDNAプローブはMTaseのメチル化部位,ニッキング酵素の認識配列の相補的ドメインと増幅ドメインを含む設計されている。DNA MTase標的の存在は二本鎖DNAメチル化を引き起こし,それ故に環状PNRを可能にする橋P3とP4と結合するとして作用し,インベルターゼシグナル分子の関与が多くの中間体DNA配列を生成した。インベルターゼ酵素はショ糖の加水分解を触媒するグルコース,その読みは定量に利用されているグルコメーターを用いてモニターを生成した。PNRとインベルターゼ酵素触媒反応の高効率に起因して,微量のターゲットを大量中間DNA配列と豊富なグルコースの生成を引き起こす定量分析のためのグルコメーターの信号応答を増幅した。戦略であるだけでなく,検出限界は0.1U mL~( 1)のDNA MTase活性に敏感でなく,他の二シトシンMTアーゼ(HaeIII MTaseとAluI MTase)に対して選択的であった。の他に,二抗癌剤(5-アザシチジンと5-アザ-2′-デオキシシチジン)をモデル阻害剤は阻害剤スクリーニング能力を試験するためにとして使用され,結果は満足すべきものである。これらの結果により,提案手法では,早期癌の診断および治療での非常に有望な用途を持つことを示した。Copyright 2017 Royal Society of Chemistry All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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核酸一般  ,  酵素一般 
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