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J-GLOBAL ID：201702242086705685   整理番号：17A1311413

CRISPR/Cas9によるCPED1遺伝子ノックアウトの活性を検証するために,CPED1遺伝子を用いることによって,遺伝子発現を確認した。【JST・京大機械翻訳】

Verification of CPED1 Gene Knockout Vector Activity by CRISPR/Cas9

著者 (6件)： Wang Fei (揚州大学動物科学与技術学院,江蘇省動物繁育与分子設計重点実験室,江蘇揚州 225009) ,  He Nana (揚州大学動物科学与技術学院,江蘇省動物繁育与分子設計重点実験室,江蘇揚州 225009) ,  Wang Yingjie (揚州大学動物科学与技術学院,江蘇省動物繁育与分子設計重点実験室,江蘇揚州 225009) ,  Ji Yanqin (揚州大学動物科学与技術学院,江蘇省動物繁育与分子設計重点実験室,江蘇揚州 225009) ,  Zhang Yani (揚州大学動物科学与技術学院,江蘇省動物繁育与分子設計重点実験室,江蘇揚州 225009) ,  Li Bichun (揚州大学動物科学与技術学院,江蘇省動物繁育与分子設計重点実験室,江蘇揚州 225009)
資料名： Zhongguo Jiaqin  (Zhongguo Jiaqin)
巻： 39  号： 7  ページ： 11-14  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3573A  ISSN： 1004-6364  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】CRISPR/Cas9技術を用いて,ニワトリ線維芽細胞(DF-1)とニワトリ胚性幹細胞(ESCs)におけるCPED1遺伝子のノックアウトを研究する。CPED1遺伝子機能の更なる研究のための技術的基礎を提供した。CPED1遺伝子の全長をクローン化した。cas9/gRNAベクターを構築し、DF-1とESCsにトランスフェクションし、フローサイトメトリーにより陽性細胞を選別し、T7E1酵素消化法により、活性の最適なノックアウトベクターを選択し、そのノックアウト効率を分析した。同時に,DF-1における脱ターゲット効率を検出した。【結果】ニワトリCPED1遺伝子を首尾よくクローン化し,3つのcas9/gRNAベクターを構築した。T7E1による酵素消化の結果、cas9/gRNA1ベクターがDF-1陽性細胞におけるノックアウト活性(37%)が最も良く、このベクターはESCs中のCPED1遺伝子を固定し、ノックアウト活性は25%であり、DF-1細胞には標的がないことが明らかになった。これらの結果は,CRISPR/Cas9が効果的にニワトリのCPED1遺伝子をDF-1とESCsにノックアウトすることができることを示した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 酵素的分解 ,  ES細胞 ,  *遺伝子 ,  *型ばらし ,  トランスフェクション ,  *遺伝子発現 ,  クローン ,  フローサイトメトリー ,  線維芽細胞 ,  ベクター
準シソーラス用語： gRNA ,  遺伝子機能 ,  *遺伝子ノックアウト法 ,  *Cas9 ,  *CRISPR配列 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (7件)： CRISPR ,  Cas9 ,  遺伝子ノックアウト ,  活性 ,  検証 ,  遺伝子 ,  遺伝子発現