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J-GLOBAL ID：201702242737012600   整理番号：17A1992879

鎖置換増幅及びローリングサークル増幅に基づくマイクロRNAの蛍光定量

Fluorometric determination of microRNA based on strand displacement amplification and rolling circle amplification

著者 (6件)： ZHOU Yunlei (Shandong Agricultural Univ., Taian, CHN) ,  LI Bingchen (Shandong Agricultural Univ., Taian, CHN) ,  WANG Minghui (Shandong Agricultural Univ., Taian, CHN) ,  WANG Jun (Shandong Agricultural Univ., Taian, CHN) ,  YIN Huanshun (Shandong Agricultural Univ., Taian, CHN) ,  AI Shiyun (Shandong Agricultural Univ., Taian, CHN)
資料名： Microchimica Acta  (Microchimica Acta)
巻： 184  号： 11  ページ： 4359-4365  発行年： 2017年11月 
JST資料番号： D0076A  ISSN： 0026-3672  CODEN： MIACAQ  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オーストリア (AUT)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 先ず,マイクロRNA-21に対する相補配列を持つテンプレートDNA AとマイクロRNA-21とのハイブリッド化をし,Bst2.0DNAポリメラーゼ緩衝液中dNTPs,nt.BstNBIニッキングエンドヌクレアーゼ及びBst2.0DNAポリメラーゼを使う鎖置換増幅を行う。次いで,テンプレートDNA Bを混合し,95°Cで反応後,T4 DNAリガーゼを含む緩衝液を加え,25°Cで75minかけてDNA Bを環状構造にする。dNTPsとBst2.0DNAポリメラーゼを含む緩衝液を加えてローリングサークル増幅反応を37°Cで4h進行させる。反応停止後,DNA染料,SYBR Green IIを加え,蛍光(λex=498nm,λem=512~600nm)検出する。マイクロRNAを10fM~0.1nMの範囲で定量でき,検出限界は1.0fMであった。実試料測定に適用した。

シソーラス用語： *アンチセンスRNA ,  *遺伝学実験技術 ,  *遺伝子診断 ,  *微生物検査 ,  発光分析 ,  エンドヌクレアーゼ ,  DNAポリメラーゼ ,  *蛍光スペクトル ,  *分光光度定量 ,  血清中濃度
準シソーラス用語： マイクロRNA-21 ,  *鎖置換増幅法 ,  ローリングサークル増幅

分類 (2件)： 有機物質の物理分析一般  (CC03031B) ,  核酸一般  (EB04010U)

タイトルに関連する用語 (6件)： 置換 ,  増幅 ,  ローリングサークル増幅 ,  マイクロRNA ,  蛍光 ,  定量