抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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目的;マウスH_(22)肝癌細胞から精製した熱ショックタンパク質GP96(HSPGP96)がマウス腹腔マクロファージ(PEMΦ)の呼吸バーストに与える影響及び細胞内外の遊離カルシウムとの関係を検討する。方法;(1)マウスのH22肝癌細胞から精製したHSPGP96を,アフィニティー,クロマトグラフィー,およびイオン交換クロマトグラフィーによって精製した。(2)細胞内過酸化物蛍光プローブH_2DCF-DAを用いて、HSPGP96がマウスのΦΦ過程に作用し、単一細胞酸素種(ROS)シグナルの変化を観察し、PEMΦ内の呼吸バースト時の変化過程を反映した。蛍光プローブFLUO-3/AMを用いて,HSPGP96によって誘発されたマウスにおける細胞内カルシウムイオン([CA(2+)]I)の変化を観察した。(3)細胞膜と細胞内カルシウムチャンネルを用いておよびを阻害した後,HSPGP96作用後のROSシグナルの変化を観察した。【結果】;(1)HSPGP96の添加により,PEM-3の蛍光強度はすぐに上昇し,70Sで増幅±%に増加した。細胞内カルシウムの遮断と細胞内カルシウム放出の抑制後の110Sの増幅はそれぞれ84.81±1と%±%であった。同時に胞内外Gaiの作用を遮断し、HSPGP96という誘発機能は明らかに抑制された。カルシウムイオンキャリアを加えると細胞内蛍光強度が迅速に増強され、110Sでに±45.83に達し、その後迅速に低下した。(2)マウスのPEMΦはHSPGP96によって刺激された後にROSの蛍光強度がすぐに上昇し、620Sは基礎蛍光値の636.78%±%に達し、その後高レベルに維持された。細胞内カルシウム放出を阻害し,細胞内カルシウム放出を阻害した後,HSPGP96を加えた後,細胞内ROSレベルは上昇した。同時に,胞内外Gai96によって刺激された後,ROSレベルは有意に増加したが,胞内外Gai96によって刺激されなかった。結論;HSPGP96はマウスのPEMΦに作用し,細胞内カルシウムを促進し細胞内Gai庫釈Gaiを促進し,これはHSPGP96が細胞内活性酸素増加を誘発する基本的な機序であることを示唆した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】