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J-GLOBAL ID：201702244197508203   整理番号：17A1061859

分裂酵母Ndc80複合体の精製と特性化【Powered by NICT】

Purification and characterisation of the fission yeast Ndc80 complex

著者 (8件)： Matsuo Yuzy (Cell Regulation Laboratory, The Francis Crick Institute, 44 Lincoln’s Inn Fields, London WC2A 3LY, UK) ,  Matsuo Yuzy (Synthetic and Systems Biochemistry of the Microtubule Cytoskeleton Laboratory, The Francis Crick Institute, 1 Midland Road, London, NW1 1AT, UK) ,  Maurer Sebastian P. (Synthetic and Systems Biochemistry of the Microtubule Cytoskeleton Laboratory, The Francis Crick Institute, 1 Midland Road, London, NW1 1AT, UK) ,  Maurer Sebastian P. (Centre for Genomic Regulation (CRG), Barcelona Institute of Science and Technology (BIST), Dr. Aiguader 88, 08003 Barcelona, Spain) ,  Maurer Sebastian P. (Universitat Pompeu Fabra (UPF), Barcelona, Spain) ,  Surrey Thomas (Synthetic and Systems Biochemistry of the Microtubule Cytoskeleton Laboratory, The Francis Crick Institute, 1 Midland Road, London, NW1 1AT, UK) ,  Toda Takashi (Cell Regulation Laboratory, The Francis Crick Institute, 44 Lincoln’s Inn Fields, London WC2A 3LY, UK) ,  Toda Takashi (Hiroshima Research Center for Healthy Aging (HiHA), Department of Molecular Biotechnology, Graduate School of Advanced Science of Matter, Hiroshima University, 1-3-1 Kagamiyama, Higashi-Hiroshima 739-8530, Japan)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 135  ページ： 61-69  発行年： 2017年 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Ndc80複合体はNdc80(Hec1),Nuf2,Spc24とSpc25から成る保存された外側動原体蛋白質複合体である。複合体は紡錘体微小管のプラス端は直接相互作用する主要な,唯一ではないにしても,プラットフォームから構成されている。分裂酵母において,いくつかの研究は,Dis1/chTOG微小管ポリメラーゼとMal3/EB1微小管プラス端追跡蛋白質を含む複数の微小管関連蛋白質は直接または間接的にNdc80に結合し,それにより安定な動原体-微小管付着を確実にすることを示した。しかし,この酵母からNdc80複合体の精製が達成されておらず,これは外側動原体は,紡錘体微小管のプラス端に結合するどのように詳細な研究を妨げている。ここでは,細菌からの分裂酵母Ndc80ホロ複合体の二段階精製を報告した。Ndc80Nuf2とSpc24 Spc25から成る二サブ複合を別々に精製した。,これら二サブ複合を混合し,サイズ排除クロマトグラフィーに適用した。再構成されたNdc80ホロ複合体は同じ化学量論を有する四個のサブユニットから構成されている。複合体は微小管結合活性を持ち,全内部反射蛍光(TIRF)顕微鏡分析は,複合体は微小管格子を結合することを示した。興味深いことに,ヒト複合体と異なり,分裂酵母複合体はdepolymerising微小管末端を追跡しなかった。更なる分析は,生理学的イオン条件下で,Ndc80ホロ複合体は検出可能なDis1に結合しないが,Mal3/EB1,Ndc80複合体は,成長する微小管プラス末端を追跡すると相互作用する代わりに示した。この結果は,Ndc80複合体はchTOGとEB1と連携して動的動原体-微小管界面の確立に重要な役割を果たすという考えを実証した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： 微小管関連タンパク質 ,  *キャラクタリゼーション ,  相互作用 ,  顕微鏡観察 ,  付着 ,  タンパク質複合体 ,  ヒト ,  再構成 ,  紡錘体 ,  化学量論 ,  蛍光 ,  細菌 ,  微小管 ,  サブユニット
準シソーラス用語： *Ndc80 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： Dis1 ,  分裂酵母 ,  動原体 ,  Ndc80複合体 ,  微小管 ,  TIRF顕微鏡観察

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (5件)： 分裂酵母 ,  Ndc80 ,  複合体 ,  精製 ,  特性化