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J-GLOBAL ID：201702245948509673   整理番号：17A1879375

真核細胞発現プラスミドpCMV-アディポネクチンの構築とそのトランスフェクションが高グルコース環境下における腎糸膜細胞の増殖に及ぼす影響に関する研究【JST・京大機械翻訳】

Construction and tansfection of pCMV-APN eukaryotic expression plasmid and its effect on high glucose-induced mesangial cells proliferation

著者 (4件)： Feng Min (350003,福建省老年医院内分泌科) ,  Wen Junping (福建省立医院内分泌科) ,  Lv Qi (350003,福建省老年医院内分泌科) ,  Huang Guoliang (福建医科大学附属協和医院内分泌科)
資料名： Zhongguo Tangniaobing Zazhi  (Zhongguo Tangniaobing Zazhi)
巻： 25  号： 7  ページ： 649-654  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3088A  ISSN： 1006-6187  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:pCMV-アディポネクチン(APN)の真核細胞発現プラスミドを構築し、マウス腎臓系細胞膜細胞にトランスフェクションした後のAPNの発現及び高グルコース環境下での腎系細胞増殖に対する影響を観察する。方法:RT-PCRによりマウス腎臓細胞膜細胞におけるAPN遺伝子断片を増幅し、酵素消化、純化後pcDNA3.1プラスミドと連結し、pCMV-APN組換えプラスミドを構築し、pCMV-APN組換えプラスミドを制限酵素消化とDNAシークエンシングにより検証した。リポフェクタミン2000を用いて,pCMV-APN真核細胞発現プラスミドを腎糸膜細胞に形質移入し,トランスフェクション後のAPN蛋白質発現をウエスタンブロットにより検出し,高グルコース環境下での細胞増殖活性をMTTアッセイにより検出した。【結果】真核生物発現プラスミドpCMV-APNは,制限酵素消化および配列決定によって首尾よく構築されたことが示された。トランスフェクション後に,APN蛋白質の発現は,有意に増加し,高グルコース環境下でのそれらの増殖活性は,空ベクターのトランスフェクション群におけるそれより有意に低かった[(0.87±0.06)対(0.60±0.01),P<0.05]。結論:pCMV-APN真核細胞発現プラスミドの構築に成功し、マウス腎系膜細胞に安定的に発現し、高グルコース誘導の増殖作用を抑制でき、APNの生物学的機能のさらなる研究に理論的基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： DNA制限酵素 ,  ベクター ,  *アディポネクチン ,  酵素的分解 ,  ウェスタンブロット法 ,  *プラスミド ,  RT-PCR法 ,  *トランスフェクション ,  細胞膜 ,  消化 ,  細胞増殖 ,  真核生物 ,  *真核細胞 ,  ヘキソース ,  アルドース
準シソーラス用語： 蛋白質発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Eukaryotic expression plasmid ,  pCMV-adiponectin ,  Mesangial cells ,  Transfection ,  Cell proliferation

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

物質索引 (1件)： グルコース

タイトルに関連する用語 (12件)： 真核細胞 ,  発現 ,  プラスミド ,  アディポネクチン ,  構築 ,  トランスフェクション ,  グルコース ,  環境 ,  腎 ,  細胞 ,  増殖 ,  研究