アミロスクラーゼのグリコシル転移活性の蛍光検出【Powered by NICT】

Seo Dong-Ho; Seo Dong-Ho; Jung Jong-Hyun; Jung Jong-Hyun; Park Cheon-Seok

文献

J-GLOBAL ID：201702246105237622 整理番号：17A1207897

アミロスクラーゼのグリコシル転移活性の蛍光検出【Powered by NICT】

Fluorescence detection of the transglycosylation activity of amylosucrase

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資料名：
巻： 532 ページ： 19-25 発行年： 2017年
JST資料番号： H0177B ISSN： 0003-2697 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：オランダ (NLD) 言語：英語 (EN)

本研究の目的は,アミロスクラーゼ(ASアーゼ)のトランスグリコシル化活性のための新規蛍光に基づくアッセイ法を調べることであった。Deinococcus geothermalis(DGAS),ASアーゼからのNeisseria polysaccharea(NPAS),DGAS B(キメラASアーゼDGASからのBドメインはDGAS背景におけるNPASのBドメインと交換した)由来のASaseのトランスグリコシル化活性は受容体とスクロースMUを用いたグルコシドドナーとして4 メチルウンベルリフェロングルコシド(MUG)へ4 メトリルウンベルリフェロン(MU)を修飾するために適用した。のHPLC(高性能液体クロマトグラフィー)の結果は,ASaseとMUGの生物変換はスクロースとMUを用いて達成することに成功したことを示した。ASaseの速度論的研究はスクロースとMUの速度論的パラメータを決定した。DGAS,DGAS BとNPASのMUのトランスグリコシル化活性の全体性能(k_/K)の順序は次の通りであった:DGAS B(8.1)>DGAS(5.0)>NPAS(0.4)。MUを用いた蛍光に基づくトランスグリコシル化アッセイは,ASアーゼのグリコシル転移活性の検出として使用されると新しいASアーゼ変異体,それらのトランスグリコシル化活性の改善をスクリーニングする可能性を持っている。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

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酵素一般

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