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J-GLOBAL ID:201702248587321869   整理番号:17A1663402

シロイヌナズナにおける耐寒性遺伝子ICE1のクローニングと機能解析【JST・京大機械翻訳】

Cloning and functional analysis of Arabidopsis thaliana cold resistance gene ICE1
著者 (6件):
資料名:
巻: 45  号:ページ: 175-182  発行年: 2017年 
JST資料番号: C5021A  ISSN: 1671-9387  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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[目的]野生型シロイヌナズナの中から耐寒性遺伝子ICE1をクローンし、Agrobacterium媒介法により、ICE1遺伝子をタバコに転換させ、その機能について研究を行った。[方法]本研究では,3つの葉を持つArabidopsis thalianaの実生からの全RNAを抽出し,RT-PCRにより,完全なオープンリーディングフレームを得た;. . 1の完全長cDNAを得た ; 1 cDNAをRT-PCRにより増幅した。植物の発現ベクターpCAMBIA3301-ICE1を構築し,Agrobacterium tumefaciens媒介形質転換によりタバコに形質転換し,PCRにより生理学的および生化学的指標を測定した。また、遺伝子組み換えタバコ植物におけるICE1遺伝子の発現特徴について分析を行った。[結果]シロイヌナズナの耐寒性遺伝子ICE1を成功裏にクローンし、そのオープンリーディングフレームの長さは1 485 bpであった。系統樹により、シロイヌナズナのICE1遺伝子とその他の種のICE1遺伝子との差が大きいことが明らかになった。アグロバクテリウム媒介法により、4株の陽性タバコ植物を得、Southern blottingの検査により、ICE1遺伝子はすでに単一コピーの形式でタバコゲノムに統合されていることが証明された。リアルタイム蛍光定量的PCRにより,ICE1遺伝子はトランスジェニック植物の根,茎,葉において発現し,4°Cの低温では未形質転換植物に比べて相対的に高い発現を示すことが示された。トランスジェニック植物の葉の相対的な電気伝導率は12.00%~17.65%減少し,プロリン含量は13.28%~24.10%増加し,MDA含有量は7.09%~14.52%減少した。ペルオキシダーゼ活性は9.39%~22.54%増加した。[結論]シロイヌナズナのICE1遺伝子の完全オープンリーディングフレーム配列をクローンし、タバコ中にICE1遺伝子を導入することにより、その耐寒性を高めることができる。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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生物学的機能  ,  遺伝子発現 
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