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J-GLOBAL ID：201702250181423111   整理番号：17A1518245

RGS二重蛍光代替レポーターを用いることにより,ブタのBMP15遺伝子に対するCRISPR/Cas9の標的効率を改善することができた。【JST・京大機械翻訳】

Improving gene targeting efficiency on the porcine BMP15 gene mediated by CRISPR/Cas9 by using the RGS surrogate reporter system

著者 (8件)： Wang Min (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006) ,  Shi Huan (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006) ,  Huang Xiang (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006) ,  Liu Xiaofeng (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006) ,  Tan Yufeng (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006) ,  Liu Xiaohong (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006) ,  Chen Yaosheng (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006) ,  He Zuyong (中山大学生命科学学院,有害生物控制与資源利用国家重点実験室,广州510006)
資料名： Yichuan  (Yichuan)
巻： 39  号： 1  ページ： 48-55  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2546A  ISSN： 0253-9772  CODEN： ICHUDW  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 中国は養豚の養殖と消費の大国であり、母豚の繁殖力を高めることは、中国の養豚産業の発展を促進する上で重要な役割を果たしている。排卵率と産子数は家畜の繁殖力に影響を与える重要な要素であり、その中でBMP15(bone morphogenetic protein 15)遺伝子はすでにヒツジの排卵数と多胎性を制御する主な遺伝子の一つとして同定されている。しかし、現在、ブタのBMP15遺伝子において、ヒツジの多胎株の天然突然変異はまだ発見されていない。高等哺乳類の遺伝子機能の保守性とCRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeat/CRISPR-associated protein 9)などのゲノム編集技術による動物ゲノムの定点修飾の効率性について研究した。CRISPR/Cas9技術を用いて、ブタのBMP15遺伝子に対して精確な遺伝的修飾を行い、ブタの類似した多胎ヒツジの天然突然変異を獲得させ、この遺伝子がブタの繁殖力に与える影響を研究し、高繁殖力の豚の新品種を育成することに対して重要な意義を持つ。本研究では、CRISPR/Cas9を用いて、長白ブタ胎児線維芽細胞(porcine embryonic fibroblasts、PEF)細胞におけるBMP15遺伝子に対してターゲットを行い、T7E1分析により、ターゲット効率がわずか5%であることを示した。その後、RGS二重蛍光代替性レポーターベクター(RFP-GFP surrogate reporter)を共トランスフェクションし、フローサイトメトリーを用いて二重蛍光細胞を選別し、ゲノムがCRISPR/Cas9で修飾された細胞に濃縮した。遺伝子ターゲッティング効率は18%まで増加した。本研究の結果により、RGS二重蛍光代替性レポーターベクターを用いることで、CRISPR/Cas9のPEF細胞におけるBMP15遺伝子へのターゲッティング効率を有効に高めることができ、今後の体細胞核移植技術によりBMP15遺伝子編集ブタを育成することに有効な探索を行ったことが明らかになった。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *遺伝 ,  突然変異 ,  養豚 ,  哺乳類 ,  *二重蛍光 ,  家畜 ,  胎児 ,  生殖能力 ,  *遺伝子 ,  遺伝子ターゲティング ,  ゲノム ,  排卵 ,  中華人民共和国
準シソーラス用語： *Cas9 ,  *CRISPR配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： BMP15 ,  CRISPR/Cas9 ,  RGS surrogate reporter system

分類 (2件)： 豚  (FD02040U) ,  飼育動物の育種  (FD01020R)

タイトルに関連する用語 (8件)： 二重蛍光 ,  代替 ,  ブタ ,  BMP15 ,  遺伝子 ,  CRISPR ,  Cas9 ,  標的