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J-GLOBAL ID：201702250241773414   整理番号：17A1509432

新しいナフタレン三脚支援を用いたプラスミド精製【Powered by NICT】

Plasmid purification by using a new naphthalene tripodal support

著者 (5件)： Santos T. (CICS-UBI - Centro de Investigacao em Ciencias da Saude, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique, 6200-506 Covilha, Portugal) ,  Proenca Z. (CICS-UBI - Centro de Investigacao em Ciencias da Saude, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique, 6200-506 Covilha, Portugal) ,  Queiroz J.A. (CICS-UBI - Centro de Investigacao em Ciencias da Saude, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique, 6200-506 Covilha, Portugal) ,  Tomaz C. (CICS-UBI - Centro de Investigacao em Ciencias da Saude, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique, 6200-506 Covilha, Portugal) ,  Cruz C. (CICS-UBI - Centro de Investigacao em Ciencias da Saude, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique, 6200-506 Covilha, Portugal)
資料名： Separation and Purification Technology  (Separation and Purification Technology)
巻： 188  ページ： 81-89  発行年： 2017年 
JST資料番号： T0428B  ISSN： 1383-5866  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 本研究の目的は,天然試料からのプラスミド(pDNA)のスーパーコイル(sc)イソ型の単離のための新しいナフタレン三脚支持を用いることであった。この担体を合成し,pDNA精製における最初である。ナフタレン三脚配位子を合成し,特性化その純度を評価し,続いてエポキシ活性化セファロースCL-6B上に固定化され,温和な条件を用い,0.32mmolナフタレンtripodal/g誘導体化Sepharose CL-6Bの配位子密度が得られた。ナフタレン三脚Sepharose CL-6B担体の完全なキャラクタリゼーションは,高分解能マジック角スピニング(HR MAS)NMR分光法,走査電子顕微鏡(SEM)及び元素分析によって行った。親和性を表面上に固定化されたナフタレン三脚配位子との間のSPRバイオセンサにより測定し,Sc pVAX1-LacZとK_Dは10mMトリス塩酸(pH:8.0)中の8.65×10~ 8±1.0×10~ 8M,25°C,高い親和性を示している。比較の理由から,親和性配位子3,8-ジアミノ-6-フェニルフェナントリジン(DAPP)もチップ表面上に固定化し,Sc pVAX1-LacZのK_Dがナフタレン三脚よりも低かった。飽和移動差核磁気共鳴分光法(STD NMR)実験はナフタレン三脚Sepharose CL-6BおよびDAPP-セファロース担体と5′-モノヌクレオチド間の相互作用は,主に疎水性相互作用とπ π積層することを示した。sc pDNAイソ型の単離は低塩濃度で達成され,4°CおよびpH=8で溶出段階で結合段階と550mMのNaClで95mMのNaClを用いて,経済と環境への影響を減少させた。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： *プラスミド ,  NMR【磁気共鳴】 ,  単離 ,  溶出 ,  走査電子顕微鏡 ,  塩化ナトリウム ,  疎水性相互作用 ,  キャラクタリゼーション ,  高分解能 ,  親和性 ,  純度 ,  ポリアセン
準シソーラス用語： 固定化 ,  プラスミドDNA ,  *三脚 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： ナフタレン三脚支援 ,  HR-MAS NMR分光法 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  超螺旋プラスミド精製

分類 (1件)： 吸着,イオン交換  (XD02060I)

物質索引 (1件)： ナフタレン

タイトルに関連する用語 (5件)： ナフタレン ,  三脚 ,  支援 ,  プラスミド ,  精製