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J-GLOBAL ID:201702252086641215   整理番号:17A1020527

アプタマーサンドイッチベースの化学ルミネセンス分析による細胞培養培地中のVEGF165の定量【Powered by NICT】

Quantitative determination of VEGF165 in cell culture medium by aptamer sandwich based chemiluminescence assay
著者 (9件):
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巻: 171  ページ: 197-203  発行年: 2017年 
JST資料番号: E0324A  ISSN: 0039-9140  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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本研究では,二種の特異的VEGF165結合アプタマー(Apt)に基づいた血管内皮増殖因子(VEGF165)定量的検出のための高感度で選択的な化学発光(CL)アッセイを開発した。VEGFは癌血管新生における主要なバイオマーカーであり,VEGFの高感度検出法は,複数の癌の学術研究および臨床診断の両方に広く求められている。著者らの実験では,VEGF165は二--結合アプタマーによって組み立てられたサンドイッチ構造における捕獲された,捕獲アプタマーはストレプトアビジン被覆磁気ビーズ(MB)上に固定化し,他のVEGF結合アプタマーは,ホスファターゼ結合に対するビオチンで標識した。Apt VEGF AptサンドイッチはMB表面上に形成された後,アルカリ性ホスファターゼ(A LP)は,二アプタマーへの修飾したCL反応を触媒した。CL基質として4-メトキシ-4-(3-ホスファートフェニル)-スピロ-(1,2-ジオキセタン-3,2-アダマンタン)(AMPPD)を適用することにより,強い信号強度が達成された。VEGF165含有量の低い1ng/mLは我々のアッセイによる標準添加試料で検出され,検量線の直線範囲は,1 20ng/mLから確認した。著者らの方法は細胞培養培地解析とオンチップ低酸素H epG2HUVEC共培養モデル研究に適用ELISAキットに相当する良好な精度を得た。著者らの開発したアッセイはVEGF165定量化における優れた性能を示し,重要なバイオマーカーと同様にプローブマイクロチップ細胞培養モデルの臨床試験に拡張できる可能性がある。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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