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J-GLOBAL ID：201702253050735056   整理番号：17A1189546

Mycobacterium tuberculosis分泌蛋白質MPT64の検出のためのDNAアプタマーの選択,特性化と応用【Powered by NICT】

Selection, characterization, and application of DNA aptamers for detection of Mycobacterium tuberculosis secreted protein MPT64

著者 (8件)： Sypabekova Marzhan (Laboratory of Biosensors and Bioinstruments, National Laboratory Astana, Nazarbayev University, 53 Kabanbay batyr Avenue, Astana, 010000, Kazakhstan) ,  Sypabekova Marzhan (School of Engineering, Nazarbayev University, 53 Kabanbay batyr Avenue, Astana, 010000, Kazakhstan) ,  Bekmurzayeva Aliya (Laboratory of Biosensors and Bioinstruments, National Laboratory Astana, Nazarbayev University, 53 Kabanbay batyr Avenue, Astana, 010000, Kazakhstan) ,  Bekmurzayeva Aliya (School of Engineering, Nazarbayev University, 53 Kabanbay batyr Avenue, Astana, 010000, Kazakhstan) ,  Wang Ronghui (Department of Biological and Agricultural Engineering, University of Arkansas, Fayetteville, AR, 72701, USA) ,  Li Yanbin (Department of Biological and Agricultural Engineering, University of Arkansas, Fayetteville, AR, 72701, USA) ,  Nogues Claude (LBPA, IDA, ENS Cachan, CNRS, Universite Paris-Saclay, F-94235, Cachan, France) ,  Kanayeva Damira (Department of Biology, School of Science and Technology, Nazarbayev University, 53 Kabanbay batyr Avenue, Astana, 010000, Kazakhstan)
資料名： Tuberculosis  (Tuberculosis)
巻： 104  ページ： 70-78  発行年： 2017年 
JST資料番号： W3216A  ISSN： 1472-9792  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 結核(TB)の病原菌,Mycobacterium tuberculosis(Mtb)の迅速検出は,この疾患の包括的制御にとって重要である。アプタマーはそれらの固有の特性のために,治療,診断とバイオセンシングにおける抗体の為の潜在的ライバルとして出現した。本研究の目的は,MPT64蛋白質に対する一本鎖DNAアプタマー,Mtb病原体の主要な分泌蛋白質の一つを選択し,特性化することであった。MPT64蛋白質に特異的なアプタマーは指数濃縮(SELEX)法によりリガンド体系的進化を用いてin vitroで選択した。選択は無作為化40 ヌクレオチド領域とssDNAライブラリーのプールを開始した。全部で10サイクルを行った,特異な配列を有する十七アプタマーは配列決定により同定した。SELEXプロセスを監視し,アプタマーの親和性と特異性に関する予備的試験を実施したドットブロット解析。酵素結合オリゴヌクレオチド試験(ELONA)はアプタマーのほとんどは最も選択性のためのR~2=0.94の直線相関を持つMPT64蛋白質に特異的であることを示した。表面プラズモン共鳴(SPR)を用いて,8.92nMの解離平衡定数K_が得られた。最も特異的なアプタマーのバイオインフォマティクス解析はMPT64に保存された独特の配列と可能性のある結合部位の存在を明らかにした。特異性は,非標的ESAT-6およびCFP-10を試験することによって決定した。に対して無視できる交差反応は,選択されたアプタマーの高い特異性を確認した。選択したアプタマはさらにELONAを用いた臨床唾液試料で試験し,91.3%と90%の感度と特異性を有していた。顕微鏡,培養陽性とヌクレオチド増幅法を標準物質として用いた。研究したアプタマーは,Mtbの医療診断ツールと検出法の開発のために使用することができた。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： *キャラクタリゼーション ,  オリゴヌクレオチド ,  検出法 ,  *結核菌 ,  結合部位 ,  一本鎖DNA ,  in vitro実験 ,  バイオセンサ ,  *分泌タンパク質 ,  病原体 ,  抗体 ,  親和性
準シソーラス用語： 特異性 ,  *アプタマー ,  *DNAアプタマー , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Mycobacterium tuberculosis ,  Diagnostics ,  MPT64 ,  Aptamer ,  SELEX

分類 (1件)： 核酸一般  (EB04010U)

タイトルに関連する用語 (5件)： Mycobacterium ,  分泌蛋白質 ,  DNAアプタマー ,  特性化 ,  応用