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J-GLOBAL ID：201702254989198584   整理番号：17A1170619

in vitroにおけるADCCバイオアッセイで使用されるFcγRIIIAエフェクター細胞の特性化:設計されたNK-92とJurkatT細胞と一次NK細胞の比較【Powered by NICT】

Characterization of FcγRIIIA effector cells used in in vitro ADCC bioassay: Comparison of primary NK cells with engineered NK-92 and Jurkat T cells

著者 (6件)： Hsieh Yao-Te (Analytical R&D, Biotherapeutics Pharm. Sci., Pfizer Inc., Chesterfield, MO, United States) ,  Aggarwal Poonam (Analytical R&D, Biotherapeutics Pharm. Sci., Pfizer Inc., Chesterfield, MO, United States) ,  Cirelli David (Analytical R&D, Biotherapeutics Pharm. Sci., Pfizer Inc., Andover, MA, United States) ,  Gu Ling (Analytical R&D, Biotherapeutics Pharm. Sci., Pfizer Inc., Andover, MA, United States) ,  Surowy Teresa (Analytical R&D, Biotherapeutics Pharm. Sci., Pfizer Inc., Chesterfield, MO, United States) ,  Mozier Ned M. (Analytical R&D, Biotherapeutics Pharm. Sci., Pfizer Inc., Chesterfield, MO, United States)
資料名： Journal of Immunological Methods  (Journal of Immunological Methods)
巻： 441  ページ： 56-66  発行年： 2017年 
JST資料番号： E0816B  ISSN： 0022-1759  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 抗体依存性細胞媒介性細胞傷害(ADCC)はいくつかの治療抗体医薬の作用(MOA)の重要な機構であり,抗体医薬品開発と維持に重要であるADCCバイオアッセイの評価。ADCCのバイオアッセイ評価に日常的に使用する,エフェクター細胞の三つのタイプは,ヒトドナー(FcγRIIIA+一次NK),FcγRIIIA設計されたNK92細胞とFcγRIIIA/NFAT RE/luc2工学JurkatT細胞からのナチュラルキラー細胞である。設計されたエフェクター細胞は古典的なNK細胞ADCCバイオアッセイの改良された精度と正確度の必要性に対処するために開発した。本研究の主な目的は,これらのADCCエフェクター細胞のヒト被験者における期待応答の最良シミュレーションを合理化し,エフェクター細胞とアッセイは,抗体薬物開発時のADCCバイオアッセイニーズに最も良く適合し同定することであった。エフェクター細胞の間の差異を特性化し,よく知られたヒト化IgG1抗体薬トラスツズマブを用いたADCC生物活性を比較した。研究三エフェクター細胞型はFcγRIIIAのV158またはF158アロタイプのどちらかを発現し,六細胞調製物を比較した。著者らの結果は,一次NK細胞におけるFcγRIIIAの最高の表面発現と細胞表面に発現したほぼ全てで加工されたNK92(V 158)細胞を実証した。対照的に,設計されたJurkatT細胞における発現は細胞表面に発現したわずかな割合が低かった。エフェクター細胞へのトラスツズマブの結合を評価する研究は一次NKとNK92(V 158)細胞におけるFcγRIIIAの最も高い親和性を示した。ADCC細胞毒性研究は一次NKにおける最大トラスツズマブ効力と設計されたNK92(V 158)細胞および人工JurkatT細胞を用いて得られた無視できる細胞溶解を示した。とは対照的に,人工JurkatT(V 158)細胞はFcγRIIIAにトラスツズマブの結合による活性化T細胞(NFAT2)活性化の核因子に対する一次NK(V/V)細胞と同様に効率的に応答し,FcγRIIIAの低い表面発現およびトラスツズマブのその低親和性にもかかわらず,これら細胞で同様のADCC経路活性化を示した。NFAT2(pNFAT2脱りん酸として測定)の活性化におけるトラスツズマブの用量反応範囲は一次およびNK92細胞のための古典的ADCCアッセイにおける応答とJurkat Tエフェクタ細胞のADCCレポーターアッセイにおける応答に非常に類似しており,分析の橋渡し。人工JurkatT細胞を用いたADCCレポーターアッセイにおいてトラスツズマブ効力は古典的ADCCアッセイにおける一次NKまたは設計されたNK92細胞のどちらかを用いて見られたものに近かった。要約では,三種類全てのエフェクター細胞系は特異的にFcγRIIIAを発現し,用量依存的ADCC経路活性を提供し,一次NK細胞と設計されたNK92細胞のみがADCCが仲介する細胞溶解を誘導することができる。設計されたジャーカットTエフェクター細胞は抗体製造上の一貫性と正確さと精度が重要である他の応用を保証するために価値がある。ADCC活性の機能的評価のために,一次NKまたはNK92(V 158)細胞は作用の生理的に関連したADCC機構を反映して良好であった。操作された細胞株,NK92細胞は一次NKよりも再現性良く挙動する可能性があるが,これは,アッセイに使用するNK細胞決定における生物学的関連性のための目的でバランスをとらなければならない。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： ヒト ,  再現性 ,  細胞毒性 ,  *in vitro実験 ,  *キャラクタリゼーション ,  治療法 ,  *ADCC ,  *NK細胞 ,  *バイオアッセイ ,  親和性 ,  抗体 ,  生物活性
準シソーラス用語： トラスツズマブ ,  創薬 ,  *エフェクター細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： FcγRIIIA ,  抗体依存性細胞介在性細胞毒性 ,  ADCCバイオアッセイ

分類 (3件)： 生体防御と免疫系研究法  (ED01020Q) ,  抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (7件)： ADCC ,  バイオアッセイ ,  エフェクター細胞 ,  特性化 ,  設計 ,  細胞 ,  NK細胞