抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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目的:新生児ラット肺組織におけるアデノウイルス媒介熱ショック蛋白質70(HSP70)の最適トランスフェクション経路、トランスフェクション量とトランスフェクション時間を検討する。方法:150匹のWistarラットを選び,乱数表法により,以下の3つの群に分けた。(1)トランスフェクション群。48匹の新生ラットをA群(尾静脈注射群)とB群(腹腔注射群)に分けた。5μL×1010PFU/mLアデノウイルス熱ショック蛋白質(HSP70)トランスフェクション液を新生ラット体内に注入し、それぞれ注射24、48、72、96時間後に各群の新生ラットを屠殺し、肺組織標本を採取した。蛍光顕微鏡を用いて、HSP70の新生ラット肺組織へのトランスフェクションの最適なトランスフェクション経路を判断した。(2)トランスフェクション群;54匹の新生児ラットをランダムに2つの群に分けた。空のウイルス群、ウイルスHSP70群、対照群には、それぞれ2.5μLの×1010PFU/mL、5μL×1010PFU/mL、10μL×1010PFU/mLのトランスフェクション液の量を与えた。尾静脈注射の72時間後に各群の新生ラットを屠殺し、肺組織標本を採取し、RT-PCR及びWestern blotを用いてHSP70のmRNA及び蛋白質レベルを測定し、アデノウイルスによるHSP70トランスフェクションの最適トランスフェクション量を確定した。(3)48匹の新生仔ラットを,24時間群,48時間群,72時間群,96時間群にランダムに分け,食塩水対照群を設定し,異なるトランスフェクション時点で,新生ラットを屠殺し,肺組織標本を採取した。HSP70のmRNAおよび蛋白質レベルをRT-PCRおよびウエスタンブロットによって検出し,肺組織におけるHSP70発現の最適トランスフェクション時間を明らかにするために,HSP70mRNAおよび蛋白質レベルを検出するために,RT-PCRおよびウェスタンブロット法を用いた。結果:(1)尾静脈注射群の新生ラットの48時間の蛍光顕微鏡下で少量の緑色蛍光シグナル標識タンパク質が見られ、72時間及び96時間に明らかな緑色蛍光シグナル標識タンパク質が見られた。(2)HSP70 mRNAと蛋白質の発現は,5μL ×10 10 PFU/mL Ad-HSP70のトランスフェクションによって増加した。(3)72時間群におけるHSP70mRNAおよび蛋白質の発現は,24時間および48時間におけるそれらより高かった(P<0.05)が,96時間におけるそれらと比較して有意差はなかった(P>0.05)。結論:新生児ラットにおけるアデノウイルス媒介HSP70の最適トランスフェクション経路は尾静脈で,最適トランスフェクション量は5μL×1010PFU/mLであり,トランスフェクション後の最適観察時間は72時間であった。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
