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J-GLOBAL ID:201702257945549668   整理番号:17A1055117

液体クロマトグラフィー質量分析を用いたアミン含有代謝産物の定量的プロファイリングのための安定な同位体N ホスホリルアミノ酸標識【Powered by NICT】

Stable isotope N-phosphoryl amino acids labeling for quantitative profiling of amine-containing metabolites using liquid chromatography mass spectrometry
著者 (13件):
資料名:
巻: 978  ページ: 24-34  発行年: 2017年 
JST資料番号: A0394A  ISSN: 0003-2670  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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安定同位体化学標識液体クロマトグラフィー-質量分析(LC MS)は,包括的なメタボロミクスプロファイリング,複雑な生物学的システムにおける代謝調節の探査のための代謝物被覆率と定量的情報を改善するための強力な戦略である。本研究では,新しい安定同位体N ホスホリルアミノ酸標識法(SIPAL)は有機リン化学に基づく尿中のアミン含有代謝産物の定量的プロファイリングのために開発された成功した。二同位体試薬,~16O_2~および~18O_2~-NジイソプロピルホスホリルアラニンN ヒドロキシスクシンイミド エステル(~十六零/~18O DIPP L Ala NHS)は,最初にアミン含有代謝産物を標識するための高収率で合成した。SIPAL戦略の性能をLC-MSを用いて20種類のL-アミノ酸,10D-アミノ酸と小ペプチドを含む標準試料の分析によって試験した。水溶液反応条件下でワンポット誘導体化反応で15分以内にSIPAL戦略のための高度に効率的で選択的な標識を観察した。N末端での中性リン酸基の導入は,標的代謝物のプロトン親和性と全体的な疎水性を増加させ,逆相カラム上での親水性代謝産物のエレクトロスプレイイオン化過程とクロマトグラフィー分離における良好なイオン化効率をもたらす。さらに,キラル代謝産物,D-アミノ酸のような,SIPAL後ジアステレオマに変換され,規則的な逆相カラム上で分離することができた。標識エナンチオマのキラリティーは~31P NMR,UV,及びMSのような種々の検出法を用いて決定し,SIPAL戦略の適用可能性を示した。添加では,生物学的試料中のキラル代謝物の絶対定量はSIPAL戦略を用いて容易に達成できた。この目的のために,健康なボランティアから採取した尿試料をLC ESI Orbitrapを用いて分析した。300以上の対異なるアミン含有代謝産物の高い相対的豊度(信号対雑音比10以上)で同定さた。最後に,標準的なペプチドは比較的MALDI-TOF MSと組み合わせたSIPAL戦略を用いて定量化した定量的プロテオミクスのためのこの方法の潜在的応用を示唆した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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有機化合物の各種分析 

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