抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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目的:スフィンゴシンキナーゼ1(SPK1)によって修飾された脂肪由来間葉系幹細胞(adipose tissue-derived stromal cells)を研究する。組織工学的骨形成能力に及ぼすADSCの影響を研究した。方法:SDラット脂肪細胞から単離したADSCを対照群(CON群)と実験群(SPK1群)に分け、それぞれ10MOIのCONとSPK1慢性感染症を感染させ、感染14日後に、それぞれアリザリンレッドとオイルレッドO染色を用いた。A595nmとA490nmを測定し、骨形成、脂肪生成能力を判定し、両群の骨芽細胞アルカリ性ホスファターゼ(alkaline phosphatase、ALP)活性の変化を測定した。SDラットの大腿骨欠損モデルを構築し、CONとSPK1の二つのグループのADSCとβリン酸三カルシウムセラミック(β-TCP)を結合した後、組織工学的骨を欠損まで圧迫し、4、6週間後にX線検査でラットの骨欠損修復状況を測定した。ウェスタンブロット法により,SPK1と骨形態形成蛋白質7(BMP7)の発現を検出した。結果:フローサイトメトリーにより,CONとSPK1のレンチウイルスの感染効率は,それぞれ94.4%と94.9%であった。SPK1蛋白質の相対的発現は,CONとSPK1群で,それぞれ(0.73±0.10)対(0.73±0.10)vs(P<0.01)であった。(1.29±0.17)P<0.05;CONとSPK1群におけるA595nmは,それぞれ(0.20±0.02)vs(P<0.01)であった。(0.41±0.01)A490nmは,それぞれ(0.72±0.01)対(0.72±0.01)vs(P<0.01)であった。(0.51±0.02)(P<0.05)CONとSPK1のALP活性は,それぞれ(1.42±0.09)vs(P<0.05)であった。(2.68±0.09)P<0.01。骨欠損修復において、4週目のSPK1群のラット骨欠損部に形成された高密度組織面積はCON群より顕著に大きく、6週目にSPK1群ラットの骨欠損が治癒した。CON群におけるBMP7の相対的発現は,48時間の感染後に,(1.13±0.16)対(1.13±0.16)対(P<0.01)に減少したが,しかし,CON群およびSPK1群におけるそれらの発現は,有意に増加した(P<0.01)。(4.46±0.23)P<0.05。【結論】SPK1によって修飾されたADSCのin vitroおよびin vivoでの骨形成能は増強され,その機構はBMP7の活性化と関連している可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】