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J-GLOBAL ID：201702258609402325   整理番号：17A1128687

E.coliからの活性非標識組換えヒト白血病阻害因子の発現,精製及び特性化【Powered by NICT】

Expression, purification and characterization of active untagged recombinant human leukemia inhibitory factor from E.coli

著者 (8件)： Xi Xueyan (Department of Immunology, School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Medicine, Shiyan 442000, China) ,  Li Xiaolu (Department of Biochemistry and Molecular Biology, State Key Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College, Beijing 100005, China) ,  Wu Fan (Department of Biochemistry and Molecular Biology, State Key Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College, Beijing 100005, China) ,  Guan Xin (Department of Biochemistry and Molecular Biology, State Key Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College, Beijing 100005, China) ,  Jin Lan (Department of Immunology, School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Medicine, Shiyan 442000, China) ,  Guo Yang (Department of Immunology, School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Medicine, Shiyan 442000, China) ,  Song Wei (Department of Biochemistry and Molecular Biology, State Key Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College, Beijing 100005, China) ,  Du Boyu (Department of Medical Biology, School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Medicine, Shiyan 442000, China)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 134  ページ： 139-146  発行年： 2017年 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： IL-6サイトカインファミリーのメンバーである白血病阻害因子(LIF)は多面的サイトカインであると考えられ,細胞増殖と分化の両方において機能する。はマウス胚性幹細胞の培養において広く使用されており,マウスモデルの注入においてそしてたぶん人類に関与している。生物医学研究におけるこのサイトカインの要件を満たすために,LIFの効率的生成に努力を続けている。しかし,低発現レベル真核生物系と貧弱な精製収率のため,組換えヒトLIFは封入体としてまたはE.coli(大腸菌)における融合蛋白質として発現させた。ここでは,E.coliとそれに続く精製法において可溶型でhLIFを発現する簡単な方法を導入した。hLIFの発現は低温(16 °C)で誘導され,最も発現hLIFのは可溶性型であることが観察された。三段階のクロマトグラフィー,産業目的のための容易にスケールアップを用いて,活性非標識hLIFは市販製品のものと比較して,類似の生物活性を持つ精製した。この方法で精製したhLIF蛋白質のエンドトキシンレベルは1Eu/μg,市販製品と同等であったよりも低いと決定された。hLIFを可溶性型で発現したとして,変性および再生法を開発する必要がなかった。hLIF蛋白質の収率はこの方法でE.coliの1g湿重量から約0.7mg hLIFと評価された。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： 大腸菌 ,  サイトカイン ,  *ヒト ,  融合タンパク質 ,  細胞増殖 ,  スケールアップ ,  真核生物 ,  生物活性 ,  封入体 ,  インターロイキン6 ,  可溶性 ,  タンパク質 ,  溶解性
準シソーラス用語： 生物医学研究 ,  マウスモデル ,  マウスES細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： 白血病阻害因子 ,  発現 ,  精製

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (8件)： 活性 ,  標識 ,  組換え ,  ヒト ,  白血病阻害因子 ,  発現 ,  精製 ,  特性化