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J-GLOBAL ID：201702261457423613   整理番号：17A1493950

生理的加水分解方向におけるS-adenosyl-L-ホモシステインヒドロラーゼの特性化のための結合分光光度アッセイ【Powered by NICT】

A coupled photometric assay for characterization of S-adenosyl-l-homocysteine hydrolases in the physiological hydrolytic direction

著者 (4件)： Kailing Lyn L. (Group of Biotechnology, Dept. of Biochemistry, University of Kassel, Heinrich-Plett-Str. 40, 34132, Kassel, Germany) ,  Bertinetti Daniela (Dept. of Biochemistry, University of Kassel, Heinrich-Plett-Str. 40, 34132, Kassel, Germany) ,  Herberg Friedrich W. (Dept. of Biochemistry, University of Kassel, Heinrich-Plett-Str. 40, 34132, Kassel, Germany) ,  Pavlidis Ioannis V. (Group of Biotechnology, Dept. of Biochemistry, University of Kassel, Heinrich-Plett-Str. 40, 34132, Kassel, Germany)
資料名： New Biotechnology  (New Biotechnology)
巻： 39  号： PA  ページ： 11-17  発行年： 2017年 
JST資料番号： W1942A  ISSN： 1871-6784  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： S-Adenosyl-L-ホモシステインヒドロラーゼ(SAHases)は重要な代謝酵素であり,その調節不全は幾つかの重篤な疾患と関連している。in vivoでは,S-adenosyl-L-ホモシステイン(SAH),種々の生物におけるメチル化反応の副産物の加水分解を触媒する。SAHはメチルトランスフェラーゼの強力な阻害剤であり,平衡からのその除去はメチル化反応のための重要な要件である。SAH加水分解はメチル基供与体S-アデノシル-L-メチオニン(SAM)の細胞再生過程の最初の段階である。しかし,in vitroでの平衡は合成方向にある。生理的に意義のある方向にSAHasesの特性化を可能にするために,著者らは生成物アデノシンを除去することによって加水分解に向けて平衡をシフトさせ,高親和性アデノシンキナーゼ(AK)を用いて結合した光度測定法を開発した。をアデノシンに変換するAMP,等モル量のADPの,ピルビン酸キナーゼ(PK)によりりん酸化され,ピルビン酸を放出を形成する。アッセイの読み出しは,乳酸へのピルビン酸の乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH)触媒還元中にNADHの消費である。アッセイの適用性をBradyrhizobium elkanii(K_M,SAH41±5μM,v_max,0.13mg/mL酵素とSAH25±1μM/分)からSAHアーゼの速度論的定数の決定のための展示された。このアッセイは,バイオテクノロジー的潜在力を持つSAHasesのin vitro特性化のための,診断におけるSAHアーゼ活性を監視するための有用なツールである。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： in vitro実験 ,  ピルビン酸キナーゼ ,  メチルトランスフェラーゼ ,  *加水分解 ,  リン酸化 ,  *キャラクタリゼーション ,  バイオテクノロジー ,  乳酸デヒドロゲナーゼ ,  親和性 ,  メチル化 ,  ドナー ,  アデニンヌクレオチド ,  ニコチンアミドヌクレオチド ,  ジヌクレオチド ,  脂肪族アルコール ,  脂肪族カルボン酸 ,  第二アルコール ,  ヒドロキシ酸 ,  脂肪族ケトン ,  ケト酸 ,  診断用薬 ,  プリンヌクレオシド ,  リボヌクレオシド

著者キーワード (5件)： 生体触媒 ,  Hydrolase ,  S-Adenosyl-L-ホモシステイン ,  動力学分析 ,  平衡シフト

分類 (3件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  核酸一般  (EB04010U) ,  細胞生理一般  (EF02010S)

物質索引 (4件)： NADH ,  乳酸 ,  ピルビン酸 ,  アデノシン

タイトルに関連する用語 (7件)： 生理 ,  加水分解 ,  ヒドロラーゼ ,  特性化 ,  分光 ,  光度 ,  アッセイ