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J-GLOBAL ID：201702263414853620   整理番号：17A1588627

CRISPR/Cas9システムにより仲介されたEZH2遺伝子の固定化Hut78細胞系の構築【JST・京大機械翻訳】

Construction of EZH2 gene site-directed knock-in Hut78 cells by CRISPR/Cas9 system

著者 (15件)： Lu Zhuolin (天津市儿童医院薬剤科 300134) ,  Xiong Xianjia (天津医科大学基礎医学院) ,  Wu Yundan (中国人民解放軍第二五四医院内分泌科) ,  Zhou Hui (天津医科大学薬学院) ,  Jia Jun (天津医院足踝二病区) ,  Wang Shuanglin (天津医科大学総医院心胸外科) ,  Wu Lili (天津医科大学基礎医学院) ,  Liu Yijie (天津医科大学基礎医学院) ,  Qiao Yang (天津医科大学基礎医学院) ,  Yang Bing (天津医科大学基礎医学院) ,  Zhao Xiujuan (天津医科大学基礎医学院) ,  Wang Qingsong (天津医科大学基礎医学院) ,  Han Chunyong (天津医科大学腫瘤医院乳房再造科,国家腫瘤臨床医学研究中心,腫瘤防治重点実験室) ,  Zhang Ling (天津医科大学基礎医学院) ,  Sun Yan (天津医科大学基礎医学院)
資料名： Tianjin Yiyao  (Tianjin Yiyao)
巻： 45  号： 5  ページ： 449-453  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2356A  ISSN： 0253-9896  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】CRISPR/Cas9システムを用いて,EZH2遺伝子をコードするHut78細胞株を構築する。方法:EZH2発現ベクターpMD-18T-EZH2と一方向性RNA(sgRNA)発現ベクターpSpCas9(BB)-2A-PurosgRNAを構築し,2つのベクターをHut78細胞に共トランスフェクションした。EZH2 mRNAの発現をqPCRにより検出し,EZH2とH3K27me3蛋白質の発現をウェスタンブロット法により検出した;。 EZH2 mRNAの発現をウェスタンブロット法により検出した。【結果】配列解析の結果,pMD-18T-EZH2とpSpCas9(BB)-2A-Pol-sgRNAの発現ベクターが完全に挿入されたことが示された。構築した2つのプラスミドをHut78細胞に共トランスフェクションし、qPCRの結果により、EZH2遺伝子はRNAレベルで発現が著しく上昇したことが示された。Western blotの結果によると、EZH2とH3K27me3タンパク質の発現レベルは明らかに上昇した。結論:CRISPR/Cas9システムを用いて、EZH2遺伝子を固定したHut78細胞株を成功的に構築した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *遺伝子 ,  定量的PCR法 ,  プラスミド ,  ベクター ,  タンパク質 ,  RNA【核酸】 ,  トランスフェクション ,  ウェスタンブロット法 ,  mRNA
準シソーラス用語： sgRNA ,  発現ベクター ,  *細胞株 ,  *EZH2 ,  *Cas9 ,  *CRISPR配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： methylation ,  EZH2 gene ,  CRISPR/Cas9 system ,  gene editing

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (8件)： CRISPR ,  Cas9 ,  仲介 ,  EZH2 ,  遺伝子 ,  固定化 ,  細胞系 ,  構築