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J-GLOBAL ID：201702265039279362   整理番号：17A1337171

日本住血吸虫の真核生物発現ベクターの構築と293T細胞におけるその発現【JST・京大機械翻訳】

CONSTRUCTION OF EUKARYOTIC EXPRESSION VECTOR OF SCHISTOSOMA JAPONICUM TOR AND ITS EXPRESSION IN 293T CELLS

著者 (8件)： Zai Jinli (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241) ,  Ma Shuai (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241) ,  Wang Tao (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241) ,  Jia Bingguang (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241) ,  Chai Shumei (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241) ,  Zhang Qian (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241) ,  Lin Jiaojiao (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241) ,  Fu Zhiqiang (中国農業科学院上海獣医研究所,上海,200241)
資料名： Zhongguo Dongwu Chuanranbing Xuebao  (Zhongguo Dongwu Chuanranbing Xuebao)
巻： 25  号： 1  ページ： 66-71  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3584A  ISSN： 1674-6422  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究では、日本住血吸虫SjSjの完全なタンパク質コード領域を増幅し、pXJ40-FLAGベクターのHindIII、Xho I制限酵素部位にクローニングし、真核発現プラスミドpXJ40-FLAG-TORを構築した。293T細胞において発現されたプラスミドを発現させ,間接免疫蛍光法,リアルタイム蛍光定量PCRおよびウエスタンブロット法により293T細胞における発現を検出した。配列解析の結果,SjTOR蛋白質のコード領域は1245bpであり,真核細胞発現プラスミドpXJ40-FLAG-TORは成功裏に構築されたことが示された。293T細胞にトランスフェクションした48時間後に,間接的免疫蛍光染色により,組換えプラスミドをトランスフェクトした細胞に特異的な緑色蛍光が観察されたが,空プラスミドの対照では観察されなかった。リアルタイム蛍光定量的PCRにより,プラスミドpXJ40-FLAG-TOR6時間後のSjTOR蛋白質遺伝子が転写され,トランスフェクション24時間後に転写レベルが最も高くなることが示された。Western blotの結果により、SjTORタンパク質の分子量は約53kDaで、FLAGモノクローナル抗体と抗jTOR-ED1抗血清によって識別できることが分かった。その結果,SjTOR蛋白質は293T細胞に発現し,SjTOR蛋白質の生物学的機能とDNAワクチンの更なる研究のための基礎を提供することが示された。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 遺伝子 ,  トランスフェクション ,  分子量 ,  ウェスタンブロット法 ,  DNA制限酵素 ,  *日本住血吸虫 ,  蛍光 ,  タンパク質 ,  モノクローナル抗体 ,  定量的PCR法 ,  *ベクター ,  プラスミド
準シソーラス用語： クローニング ,  FLAG ,  *293T細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Schistosoma japonicum ,  TOR protein ,  gene clone ,  eukaryotic expression

分類 (1件)： 感染症・寄生虫症一般  (GD01010H)

タイトルに関連する用語 (6件)： 日本住血吸虫 ,  真核生物 ,  発現ベクター ,  構築 ,  293T細胞 ,  発現