抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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目的:ゲフィチニブ誘導前後の肺癌幹細胞miRNAsの発現の差異を測定し、miRNAsが肺癌幹細胞のゲフィチニブ耐性に与える影響を検討する。方法:フローサイトメトリーによりヒト肺癌細胞株A549から肺癌幹細胞を分離した。肺癌幹細胞を1μmol/Lのゲフィチニブを含む培養液中で培養し、5日間誘導し、miRNAチップを用いて誘導前後の肺癌幹細胞における差異発現のmiRNAsを測定した。リアルタイム蛍光定量的PCR(RT-PCR)によりmiRNAチップの結果を検証した。選別されたmiRNAsを阻害物質と模倣物を構築し、陽イオンリポソーム法により肺癌幹細胞にトランスフェクションした(抑制物をトランスフェクションする抑制群、トランスフェクション物を増強する)。一方,非トランスフェクション群と非トランスフェクション群の肺癌幹細胞を陰性対照群として用い,非トランスフェクション群と非形質移入群の肺癌幹細胞を,対照群として用いて,肺がん幹細胞を陰性対照群とした。ゲフィチニブの感受性に及ぼすその影響を,MTT法によって観察した。結果:miRNAチップの結果により、ゲフィチニブによる誘導前後の肺癌幹細胞における19の発現変化が2倍以上のmiRNAsがあることが示された。アップレギュレーションしたmiRNAsは14本、ダウンレギュレーションしたmiRNAsは5本あり、RT-PCRによる検証の結果はチップの結果と一致した。スクリーニングされたmiR-21を用いて、阻害物と模擬物を構築し、肺癌幹細胞にトランスフェクションすることに成功した。結果は以下を示した。ゲフィチニブによるトランスフェクションの48時間後の肺癌幹細胞に対する抑制率(IC50)は,非トランスフェクション群および陰性対照群に比して有意に低かった(P<0.05)。ゲフィチニブによるトランスフェクション後48時間の肺癌幹細胞に対するIC50値は非トランスフェクション群と陰性対照群より明らかに高かった(P<0.05)。結論:ゲフィチニブ誘導前後の肺癌幹細胞において差異発現のmiRNAsが存在し、肺癌幹細胞miR-21の発現を制御することは肺癌幹細胞の化学療法薬物に対する敏感性に影響を与えることができる。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
