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J-GLOBAL ID:201702267471295186   整理番号:17A0074440

茶遺伝子のクローニング、原核発現及び植物の過剰発現ベクターの構築【JST・京大機械翻訳】

Cloning and Prokaryotic Expression of Selenocysteine Methyltransferase Gene from Tea Plant and Its Plant Overexpression Vector Construction
著者 (7件):
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巻: 29  号:ページ: 1540-1546  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3020A  ISSN: 1001-4829  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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本研究の目的は,茶(CAMELLIA メチルトランスフェラーゼ)のセレン濃縮のためのキー(SMT メチルトランスフェラーゼ,SMT)遺伝子遺伝子を発見することである。寧州2のトランスクリプトーム配列決定結果に基づき、RACEによりこの遺伝子のCDNA全長をクローニングし、原核発現とウエスタンブロット法によりこの遺伝子を検証し、その後、過剰発現ベクターを構築し、AGROBACTERIUM TUMEFACIENSに転化した。結果は以下を示す。このCDNAの全長は1277BPであり、オープンリーディングフレーム(OPEN READING FRAME, ORF)は1050BPであり、NCBIで公表された茶樹のこの遺伝子のORF配列に8つの点突然変異があり、しかもGTCGTC配列が欠けている。CSSMT遺伝子は349アミノ酸をコードした。そのアミノ酸配列はブラックコットンウツド,野生ダイズ,ASTRAGALUSのSMTおよび川桑のホモシステイン-S-メチルトランスフェラーゼ2(HMT-S-メチルトランスフェラーゼ2,HMT2)のアミノ酸配列と高い類似性を示した。標的蛋白質の分子量は約38KDAであり,水溶性蛋白質であり,予測結果と一致した。CSSMT遺伝子の過剰発現ベクターの構築に成功し,CSSMTを持つAGROBACTERIUM株を得た。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子発現  ,  酵素生理 

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