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J-GLOBAL ID:201702269644624393   整理番号:17A1602124

ビオチン-アフィニティー増幅酵素結合イムノソルベント検定法によるフラシリン代謝物の測定【JST・京大機械翻訳】

Determination of nitrofurazone metabolite by biotin-avidin enzyme-linked immunosorbent assay
著者 (6件):
資料名:
巻:号:ページ: 394-401  発行年: 2017年 
JST資料番号: C3357A  ISSN: 2095-0381  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】競合的ビオチン-アフィニティー増幅酵素結合免疫吸着検定法(ELISA-ELISA)によるフラシリン代謝物の検出のための新しい方法を開発すること。。 . . .【方法】モノクローナル抗体と包接原の最適希釈倍数を,チェス盤法によって決定した。単一因子実験により,セイヨウワサビペルオキシダーゼの標識化ストレプトアビジン(SA-HRP)の希釈倍数,閉鎖液濃度,競合反応時間,ビオチン標識ヤギ抗二倍体(biotinylated goat-mouse ImmunoglobulinG,Biotin-IgG)のインキュベーション時間,SA-HRPのインキュベーション時間と発色時間を最適化した。標準曲線を確立し、方法の感度、特異性、正確度と精密度に対して方法学的評価を行った。【結果】最適実験条件は以下の通りであった。被覆の希釈率は1:1であった。800,モノクローナル抗体の希釈倍率は1:1であった。12800,SA-HRPの希釈倍率は1:1であった。8000,1%脱脂液,30分の競合反応時間,30分のBiotin-IgG培養時間,60分のSA-HRP培養時間,15分の発色時間。 1分の最適反応時間であったことを結果は示したが,これらの結果は以下の通りであったことを示していることが示された。最適条件下では,線形方程式はY=-0.3299X+0.4272(r2=0.990),IC50は0.601ng/mL,線形範囲は0.074~4.883ng/mLであった。回収率は88.8%~98.5%で、バッチ内変動係数(coefficient of variation、CV)とロット間CVはそれぞれ1.2%~3.6%と2.5%~5.1%であった。確立した方法と他の構造類似体及び誘導体化試薬の交差反応率(cross reactivity,CR)はいずれも0.1%以下であり、BA-ELISAと高速液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法の回収率はいずれも85%~115%の範囲内であった。結論:BA-ELISA法は感度が高く、特異性がよく、再現性が良く、動物組織中のフラシリン代謝物の快速スクリーニングに適している。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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バイオアッセイ 
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