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J-GLOBAL ID：201702274287000889   整理番号：17A1545777

大腸菌宿主細胞機構を用いたPD-L1細胞外ドメインの高レベル原核生物発現と精製システムの構築【Powered by NICT】

Construction of high level prokaryotic expression and purification system of PD-L1 extracellular domain by using Escherichia coli host cell machinery

著者 (9件)： Kalim Muhammad (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Chen Jie (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Wang Shenghao (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Lin Caiyao (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Ullah Saif (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Liang Keying (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Ding Qian (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Chen Shuqing (Department of Pharmaceutical Analysis, College of Pharmaceutical Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China) ,  Zhan Jinbiao (Department of Biochemistry and Genetics, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310058, PR China)
資料名： Immunology Letters  (Immunology Letters)
巻： 190  ページ： 34-41  発行年： 2017年 
JST資料番号： E0738B  ISSN： 0165-2478  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： プログラム細胞死1リガンド1(PD-L1)は癌細胞の膜上に高発現膜貫通蛋白質,T細胞上のPD-1の阻害受容体に結合し,抗腫瘍免疫応答を減弱するである。PD1とPD-L1相互作用の遮断の戦略が抗癌剤開発のための広く用いられている。PD-L1のDNA符号化細胞外ドメインはpET30(+)及び大腸菌BL21(DE3)系でクローン化し,発現させた。PD-L1細胞外ドメインのクローニングPCRと酵素消化により確認した。クローン化標的遺伝子の配列分析は,元の配列の100%の相同性を示した。組換蛋白質は1mM/mL IPTGを用いて発現させ,Ni-NTAカラム上でのアフィニティークロマトグラフィーで精製し,SDS-PAGE及びウェスタンブロット分析により確認した。結果は,筆者らが構築したpET30(+)/PDL1ECDシステムは38.1kDaの分子量を持つ望ましい組換え蛋白質を産生する効率的にすることを示した。原核生物発現系はPD-1/PD-L1結合阻害の役割をさらに容易にすることをPD-L1細胞外ドメインを発現する簡単な方法を提供し,価値ある薬物と抗体生産に役立つ。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： SDS-PAGE ,  相同性 ,  T細胞 ,  ウェスタンブロット法 ,  酵素的分解 ,  *大腸菌 ,  組換タンパク質 ,  抗腫瘍薬 ,  腫瘍細胞 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  クローン ,  DNA【核酸】 ,  膜貫通タンパク質
準シソーラス用語： *エクトドメイン ,  *CD274抗原 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： PD-1 ,  CD274 ,  発現 ,  Antibody ,  免疫療法 ,  PD-L1

分類 (1件)： 細胞生理一般  (EF02010S)

タイトルに関連する用語 (8件)： 大腸菌 ,  宿主細胞 ,  PD-L1 ,  細胞外ドメイン ,  高レベル ,  原核生物発現 ,  精製 ,  構築