抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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【目的】胚性幹細胞の微小環境で培養した角膜縁幹細胞(LSCs)の自己更新と分化に及ぼすマイクロRNA-31(miR-31)の影響を調査する。方法:20%の胚性幹細胞培養上清(ESC-M M)を培養し,LSCsを培養するために,T-20細胞を培養した(ESCs-20);。 LSCsに対して培養を行うために,培養を行うために培養を行った。ESC-CM群の細胞をmiR-31またはAntago-31にトランスフェクトし,細胞クローン形成能の変化を検出した。フローサイトメトリーにより細胞周期とアポトーシスの変化を分析し、qPCRによりFIH-1、P21、P63、ABCG2、CK3、miR-31、miR-143、miR-145、miR-184の発現状況を測定した。CK3,Cx43 P63,ABCG2,Survivin,FIH-1,P21,カスパーゼ-3の発現を,免疫蛍光法とウエスタンブロット法によって検出した。結果:miR-31 mimic群におけるCFEは,miR-31 inhibitor群におけるそれより有意に低かった[(3.00±1.00)%対(6.90±0.79%),P<0.05]。Antago-31群におけるCFE[(8.90±0.53)%対(7.27±0.80),P<0.05]は,miR-31群におけるそれより有意に高かった[(9.33±2.88)%対(16.00±1.73)%(P<0.05)];P<0.05)。.・・・・・・・・・・・............. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ( 9.33±2.88)%対(16.00±1.73)%。Antago-31群におけるS期の比率は,(22.33±2.58)%対(15.33±0.58)%であり,miR-31群におけるアポトーシス率は,miR-31群より有意に高かった(31.13±7.56%対4.83±0.38%,P<0.05)。Antago-31群におけるアポトーシスの比率は,(3.03±0.23)%対(5.93±153%)であり,それは,Ir-antago群におけるそれより有意に低かった(P<0.05)。miR-31 mimc処理を行った後、P63、ABCG2、Survivin、FIH-1、miR-143、miR-145の発現量は低下した。しかし,P21,Cx-43,CK3,miR-31,miR-184の発現は,有意に増加した(P<0.05)。antago-31処理群において,P63,ABCG2,Survivin,FIH-1,miR-143,miR-145の発現は増加した。一方,P21,Cx-43,CK3,miR-31,miR-184の発現は有意に減少した(P<0.05)が,カスパーゼ-3の発現レベルはantago-31処理群において比較的低いレベルに維持された。結論:Antago-31のトランスフェクションは,LSCsにおけるFIH-1の発現を増加させることができる。また,miR-31発現レベルのダウンレギュレーションは,LSCsの維持を促進し,ESC-CMは,miR-31/FIH-1/P21を阻害することによって,LSCsの更新と分化を制御した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
