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J-GLOBAL ID:201702282384902060   整理番号:17A1485135

から臨床試料完全ゲノムへ:ハイスループット深部配列決定のためのHIV-1RNAの抽出のための方法の比較【Powered by NICT】

From clinical sample to complete genome: Comparing methods for the extraction of HIV-1 RNA for high-throughput deep sequencing
著者 (20件):
資料名:
巻: 239  ページ: 10-16  発行年: 2017年 
JST資料番号: A0381D  ISSN: 0168-1702  CODEN: VIREDF  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
抄録/ポイント:
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BEEHIVE(ヨーロッパにおけるHIVの進化と疫学を埋める)プロジェクトは,病原性ウイルスの遺伝的寄与を検討するためのハイスループット大規模シークエンシング技術を用いたHIV-1感染ヨーロッパ人を>3000からほぼ完全なウイルスゲノムを解析することである。データを特性化する短配列読み取りの豊度からより大きな隣接配列(コンティグ)を生成する,RNAウイルスゲノムのための新しいde novoアセンブラを含む計算パイプラインの開発に続いて,ゲノム配列決定成功を決定するもう一つの分野は投入されたRNAの品質と量である。125患者の血漿試料を用いたパイロット実験を行っ長アンプリコンゲノム配列決定のためのHIV-1ウイルスRNAの単離のための最適な方法を検討した。QIAampウイルスRNAミニキット(Qiagen)による手動分離は,MagNA Pure96装置(Roche Diagnostics)と組み合わせたQIAcubeロボットシステム,m2000spシステム(Abbott分子)による自動抽出とmSample調製システムRNAキット,MagNA Pure96システムを用いたロボット抽出したRNAよりも優れていた。~1.9、3.6、3.0および3.5kb,とほぼ完全なウイルスゲノムのその後の回復の四HIV-1アンプリコンの増幅をスコア化した。616BEEHIVE患者試料はウイルスRNA分離のためのQIAampウイルスRNAキットを用いた四重複アンプリコンにおけるゲノムの増幅に影響する因子を決定するために分析した。低血漿ウイルス負荷と高い試料年齢(1999年以前の貯蔵)の両方は,>3kbウイルスアンプリコンの増幅に負の影響を及ぼした。>100,000コピー/mlの血漿ウイルス量は試料の86%の全四アンプリコンの増幅に成功した,この値は<20,000コピー/mlのウイルス負荷の試料で46%に低下した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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ウイルス学一般  ,  ウイルスによる植物病害 

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