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J-GLOBAL ID：201702282775059198   整理番号：17A1885575

ニワトリPERKの原核発現とポリクローナル抗体の調製【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of chicken PERK kinase

著者 (8件)： Yuan Xiaoqin (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002) ,  Liu Mengqian (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002) ,  Li Chunyan (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002) ,  Chen Shiyi (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002) ,  Xu Lihui (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002) ,  Zhou Wuduo (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002) ,  Wu Yijian (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002) ,  Wang Quanxi (福建農林大学福建省獣医中薬与動物保健重点実験室,福建 福州,350002)
資料名： Fujian Nonglin Daxue Xuebao. Ziran Kexue Ban  (Fujian Nonglin Daxue Xuebao. Ziran Kexue Ban)
巻： 46  号： 4  ページ： 428-433  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2897A  ISSN： 1671-5470  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： ニワトリの蛋白質キナーゼR様小胞体キナーゼ(PERK)遺伝子配列に基づき、抗原ペプチドの分析を行い、大きな断片の抗原エピトープを含む約1500bpの一つの遺伝子(15~1515bp)を選択し、特異的プライマーを設計し、RT-PCR増幅を行った。組換えプラスミドpET-32a(+)-PERKを構築し,BL21(DE3)受容体細胞に形質転換した。誘導された発現条件を最適化し、組換えタンパク質を精製し、ポリクローナル抗体を作製し、PCRにより同定し、制限酵素消化と配列決定の結果により、pET-32a(+)-PERK組換えプラスミドを構築し、SDS-PAGE電気泳動により同定したことが明らかになった。組換蛋白質の発現は,1.0mmol L-1のIPTGと25°Cで9時間誘導された後に最大に達した。蛋白質精製の結果は,100mmol L-1のイミダゾール溶出液が組換え蛋白質をより良く溶出し,精製蛋白質を得ることができることを示した。免疫の終了後、抗体価の測定結果により、調製したポリクローナル抗体の力価は1に達したことが明らかになった。32000は,組換え蛋白質と特異的に結合することができた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 形質転換 ,  最適化 ,  *ポリクローナル抗体 ,  遺伝子 ,  プラスミド ,  RT-PCR法 ,  小胞体 ,  エピトープ ,  組換タンパク質 ,  タンパク質 ,  SDS-PAGE ,  電気泳動
準シソーラス用語： 蛋白質精製 ,  遺伝子配列 ,  *PERK , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： chicken protein kinase R-like ER kinase ( PERK) ,  prokaryotic expression ,  polyantibody

分類 (2件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (5件)： ニワトリ ,  PERK ,  発現 ,  ポリクローナル抗体 ,  調製