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J-GLOBAL ID：201702283042917824   整理番号：17A1331011

ピロロキノンキノンの高スループット検出法の確立と最適化【JST・京大機械翻訳】

Establishment and Optimization of the High-Throughput Measurement of Pyrroloquinoline Quinone

著者 (3件)： Xia Yu (江南大学工業生物技術教育部重点実験室,江蘇无錫 214122;江南大学生物工程学院,江蘇无錫 214122) ,  Zhou Jingwen (江南大学工業生物技術教育部重点実験室,江蘇无錫 214122;江南大学生物工程学院,江蘇无錫 214122) ,  Chen Jian (江南大学工業生物技術教育部重点実験室,江蘇无錫 214122;江南大学生物工程学院,江蘇无錫 214122)
資料名： Shipin yu Shengwu Jishu Xuebao  (Shipin yu Shengwu Jishu Xuebao)
巻： 36  号： 2  ページ： 122-128  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2433A  ISSN： 1673-1689  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： ピロロキノンキノンキノン(PQQ)は新しい補酵素であり、広い応用前景がある。従来のPQQ検出法は発酵液中のPQQ濃度を測定する際に一定の欠陥があり、しかも検出効率が低い。本研究は大腸菌(Escherichia coli BL21(DE3))においてE.coli K-12由来のグルコースデヒドロゲナーゼ(PQQGDH)を発現させ、親和性クロマトグラフィーによりPQQGDHを分離精製した。高濃度と高純度のPQQGDHを得た。酵素溶液とPQQサンプルの二重因子直交実験により、従来の組換え酵素の反応システムを改良し、96ウェルプレートのハイスループット検出に適した反応システムを得た。結果により、30μLの精製後、酵素液、2μL PQQサンプルと1.2mLの発色剤を配合した発色システムの検出効果が最も良いことが分かった。この方法は線形範囲が大きく、高い精度と再現性がある。本研究において、高濃度、高純度のPQQGDHを96ウェルプレートと酵素標識装置に配合することで、確立したPQQハイスループット測定方法は、実験の誤差を低減するだけでなく、PQQ発酵液サンプルの検出効率を大幅に向上させた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *最適化 ,  再現性 ,  酵素 ,  検出効率 ,  補酵素 ,  大腸菌 ,  *検出法 ,  発色 ,  グルコースデヒドロゲナーゼ ,  線形性 ,  発酵液 ,  反応系 ,  アフィニティークロマトグラフィー
準シソーラス用語： 高純度 ,  高濃度 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： pyrroloquinoline quinone ,  D-glucose dehydrogenase ,  affinity purification ,  enzymatic measurement ,  high-throughput measurement

分類 (1件)： クロマトグラフィー,電気泳動  (CC01050S)

タイトルに関連する用語 (3件)： 高スループット ,  検出法 ,  最適化