抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】高グルコース環境におけるラット網膜ミュラー細胞の活性およびミトコンドリアROS(ROS)の産生に及ぼす5,6-ジヒドロシクロペンテン1,2-ジチアシクロペンテン-3-チオン(CPDT)の影響を研究する。本研究では,高グルコース環境におけるミュラー細胞に対するCPDTの保護作用とそのメカニズムについて予備的に検討した。【方法】Sprague-Dawleyラットを,25mmol/Lの対照群(A群),65mmol/Lの高グルコース群(B群),高グルコース+45μmol/LのCPDT群(C群),高グルコース+60μmol/LのCPDT群(D群),高グルコース+70μmol/LのPDT群(E群)に分けた。72時間培養した後に,水溶性テトラゾリウム塩(WST)-8法を用いて,各群のMueller細胞の相対的増殖率を測定した。フローサイトメトリー(FCM)を用いて,Mueller細胞におけるROS産生とアポトーシス率を測定した。ウェスタンブロット法を用いて,Mrller細胞における核因子E2関連因子2(Nrf2),ヘムオキシゲナーゼ-1(HO-1),B細胞リンパ腫/白血病-2(Bcl-2)およびBcl-2の発現を測定した。結果:WST-8法による測定結果により、A群と比較すると、B群のMueller細胞活性は明らかに低下し、統計学的有意差が認められた(t=39.59、P<0.05)。B群と比較して,C群におけるMueller細胞の活性は,有意に増加しなかった(t=0.97,P>0.05)。D,E群におけるMlller細胞活性は,有意に回復した(t=-4.67,-7.52,P<0.05)。フローサイトメトリーの結果は,群Aと比較して,群BにおけるROS産生が有意に増加することを示した(t=-30.99,P<0.05)。B群と比較して,D群におけるROSレベルは有意に減少し(t=27.68,P<0.05),ウエスタンブロット法によって検出された結果は,A群と比較して有意差を示した。(t=27.68,P<0.05)。B群において,Bax,Nrf2,HO-1蛋白質の発現は有意に上方制御された(t=-1.03,-63.17,-11.44,P<0.05)。Bcl-2蛋白質発現は有意に下方制御された(t=7.861,P<0.05)。B群と比較して,D群におけるNrf2,HO-1およびBax蛋白質の発現は,有意に減少した(t=15.11,26.59,6.27,すべてP<0.05)。Bcl-2蛋白質の発現は,有意に増加した(t=-6.53,P<0.05)。【結論】CPDTは,高グルコースの下でのMueller細胞におけるROS含有量を減少させ,Nrf2,HO-1およびBax蛋白質発現を下方制御することができる。そのメカニズムは、Nrf2/HO-1酸化ストレス経路を活性化し、Bcl-2タンパク質間のバランスを変化させ、ミトコンドリアの酸素フリーラジカルの生成に影響を与え、それによりアポトーシスを抑制することができる。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】